Hlavný komplex histokompatibility………………………………………...3

Štruktúra hlavného histokompatibilného komplexu………………………………6

Molekuly hlavného histokompatibilného komplexu………………………………..8

Funkcie hlavného histokompatibilného komplexu………………………………..14

Antigény MHC: história výskumu……………………………………………………………………………………………………………………………… 16

Zoznam použitej literatúry………………………………………………...18
Hlavný komplex histokompatibility.

Hlavným histokompatibilným komplexom je skupina génov a antigénov bunkového povrchu, ktoré kódujú a ktoré zohrávajú rozhodujúcu úlohu pri rozpoznávaní cudzích látok a rozvoji imunitnej odpovede.

Antigény, ktoré poskytujú vnútrodruhové rozdiely u jedincov, sa označujú ako aloantigény, a keď sú zahrnuté do procesu odmietnutia alogénnych tkanivových štepov, stávajú sa známymi ako antigény tkanivovej kompatibility (histokompatibility). Evolúcia zafixovala jedinú oblasť úzko prepojených génov histokompatibility, ktorých produkty na bunkovom povrchu poskytujú silnú bariéru pre alotransplantáciu. Výrazy "hlavné histokompatibilné antigény" (hlavné histokompatibilné antigény) a "hlavný histokompatibilný génový komplex" (MHC) (hlavný histokompatibilný génový komplex) sa vzťahujú na génové produkty a gény tejto chromozomálnej oblasti. Početné minoritné histokompatibilné antigény sú naopak kódované viacerými oblasťami genómu. Zodpovedajú slabším aloantigénnym rozdielom medzi molekulami, ktoré vykonávajú rôzne funkcie.

K objavu MHC došlo pri štúdiu problematiky vnútrodruhového tkanivového štepenia.

Potom sa najprv v hypotetickej, na základe bunkovej fenomenológie a potom v experimentálne dobre zdokumentovanej forme pomocou metód molekulárnej biológie zistilo, že receptor T-buniek nerozpoznáva cudzí antigén samotný, ale jeho komplex s molekulami riadenými génov hlavného histokompatibilného komplexu. V tomto prípade sa molekula MHC aj fragment antigénu dostanú do kontaktu s receptorom T-buniek.

MHC kóduje dve sady vysoko polymorfných bunkových proteínov, nazývaných molekuly MHC triedy I a triedy II. Molekuly triedy I sú schopné viazať peptidy s 8-9 aminokyselinovými zvyškami, molekuly triedy II sú o niečo dlhšie.

Vysoký polymorfizmus molekúl MHC, ako aj schopnosť každej bunky prezentujúcej antigén (APC) exprimovať niekoľko rôznych molekúl MHC, umožňuje prezentáciu mnohých rôznych antigénnych peptidov T bunkám.

Treba poznamenať, že hoci sa molekuly MHC zvyčajne nazývajú antigény, vykazujú antigenicitu iba vtedy, keď sú rozpoznávané imunitným systémom geneticky odlišného organizmu a nie vlastným, napríklad počas alotransplantácie orgánov.

Prítomnosť génov v MHC, z ktorých väčšina kóduje imunologicky významné polypeptidy, naznačuje, že tento komplex sa vyvinul a vyvinul špecificky na implementáciu imunitných foriem ochrany.

Existujú tiež molekuly MHC triedy III, ale molekuly MHC triedy I a molekuly MHC triedy II sú z imunologického hľadiska najdôležitejšie.

hlavný histokompatibilný komplex charakterizovaný mimoriadne výrazným polymorfizmom. Žiadny iný genetický systém v tele nemá toľko alelických foriem ako gény MHC.

Biologický význam takého výrazného polymorfizmu zostal dlho nepochopiteľný, hoci určitý selektívny význam takejto alelickej variability bol zrejmý. Následne sa dokázalo, že takýto polymorfizmus priamo súvisí s procesom prezentácie antigénnych determinantov T bunkám.

Fenomén genetickej kontroly imunitnej odpovede je spojený s polymorfizmom MHC antigénov. V prípadoch, keď sa aminokyselinové zvyšky, ktoré tvoria antigén viažucu štrbinu molekuly triedy II, neschopné viazať peptidový fragment cudzieho antigénu, T-pomocníci zostávajú nereaktívni a ich pomoc B-bunkám nie je realizovaná. Táto okolnosť je príčinou geneticky podmieneného defektu imunitnej odpovede.

Hlavné udalosti, ktoré viedli k vytvoreniu MHC génovej diverzity v priebehu evolúcie, sú spojené s tandemovými duplikáciami, bodovými mutáciami, rekombináciami a konverziou genetického materiálu. Tandemové duplikácie (proces opakovania pôvodného génu na rovnakom chromozóme) sú dobre známe pre mnohé genetické systémy, ktoré riadia syntézu proteínov, napr. imunoglobulíny. Výsledkom tohto procesu je vznik viacerých polygénnych foriem molekúl MHC. Známe sú aj spontánne substitúcie jednotlivých nukleotidov pri replikácii DNA (bodové mutácie), ktoré vedú k vzniku alelických génov, ktoré podmieňujú aj polymorfizmus proteínov. Rekombinácie medzi jednotlivými úsekmi homológnych chromozómov počas meiózy môžu viesť k výmene tak celých úsekov týchto chromozómov, ako aj jednotlivých génov a dokonca aj častí génov. V druhom prípade sa proces nazýva génová konverzia. Mutácie, rekombinácie a konverzie génov vytvárajú rôzne ich alelické formy a určujú polymorfizmus MHC antigénov.

Takýto vysoký stupeň polymorfizmu má potenciálnu hodnotu pre prežitie druhu a práve vďaka nemu sa celý druh nestáva obeťou mikrobiálnej mimikry, v ktorej exprimujú štruktúry konformne blízke produktom MHC. T-bunky, schopné rozpoznať jedinečnú individuálnu kombináciu špecifík vlastného organizmu, sú schopné reagovať na produkty takejto mimikry, akoby boli cudzie. Okrem toho je možné, že takýto vysoko vyvážený polymorfizmus produktov MHC poskytuje širšiu škálu antigénov rozpoznávaných imunitným systémom daného druhu, ako aj heterózu (hybridná sila), keďže maximálna alelová kombinatorika sa vyskytuje u heterozygotov. Súrodenci majú šancu jedna ku štyrom, že budú identickí pre antigény MHC.
Štruktúra hlavného histokompatibilného komplexu.

Chromozomálna hybridizácia zistila, že MHC systém je lokalizovaný na krátkom ramene 6. ľudského autozomálneho chromozómu, zatiaľ čo u myší je lokalizovaný na 17. chromozóme.

R
je. 1. Schematické znázornenie 6. chromozómu.
Hlavný komplex histokompatibility zaberá významný úsek DNA, vrátane až 4 x 106 párov báz alebo približne 50 génov. Hlavným znakom komplexu je výrazná polygenita (prítomnosť niekoľkých nealelických úzko prepojených génov, ktorých proteínové produkty sú štrukturálne podobné a vykonávajú identické funkcie) a výrazný polymorfizmus - prítomnosť mnohých alelických foriem toho istého génu. Všetky gény komplexu sa dedia podľa spoludominantný typ.

Polygénnosť a polymorfizmus (štrukturálna variabilita) určujú antigénnu individualitu jedincov daného druhu.

Všetky gény MHC sú rozdelené do troch skupín. Každá skupina zahŕňa gény, ktoré riadia syntézu polypeptidov jednej z troch tried MHC (I, II a III) (obr. 3.5). Medzi molekulami prvých dvoch tried sú výrazné štrukturálne rozdiely, ale zároveň sú podľa všeobecného plánu štruktúry všetky rovnakého typu. Zároveň sa nezistila žiadna funkčná alebo štruktúrna podobnosť medzi génovými produktmi triedy III na jednej strane a triedami I a II na druhej strane. Vo všeobecnosti je funkčne izolovaná skupina viac ako 20 génov triedy III – niektoré z týchto génov kódujú napr. komplementové systémy(C4, C2, faktor B) alebo molekuly zapojené do spracovanie antigénu .

Oblasť lokalizácie génov kódujúcich komplex myších molekúl MHC je označená ako H-2, pre ľudí - HLA.

HLA-A, HLA-B a HLA-C sú chromozomálne lokusy, ktorých gény riadia syntézu „klasických“ molekúl (antigénov) I. triedy ľudského MHC a kódujú ťažký reťazec (alfa reťazec). Oblasť týchto lokusov zaberá oblasť dlhšiu ako 1500 kb.

Syntéza molekúl (antigénov) ľudského MHC II. triedy je riadená génmi oblasti HLA-D, ktoré kódujú minimálne šesť variantov alfa a desať variantov beta reťazcov (obr. 3.5). Tieto gény obsadzujú tri lokusy HLA-DP, HLA-DQ a HLA-DR. Väčšina molekúl triedy II patrí k produktom ich expresie.

Okrem toho oblasť HLA-D zahŕňa gény HLA-LMP a HLA-TAP. Proteíny s nízkou molekulovou hmotnosťou riadené týmito génmi sa podieľajú na príprave cudzieho antigénu na prezentáciu T bunkám.

Gény ľudských lokusov HLA-A, HLA-B a HLA-C kódujú ťažký reťazec (alfa reťazec) „klasických“ molekúl MHC I. triedy. Okrem toho sa mimo týchto lokusov našlo množstvo ďalších génov, ktoré kódujú „neklasické“ molekuly MHC triedy I a nachádzajú sa v takých lokusoch HLA, ako sú HLA-X HLA-F, HLA-E, HLA-J, HLA-H, HLA -G, HLA-F.

Molekuly hlavného histokompatibilného komplexu.

Priestorová organizácia molekúl MHC bola objasnená röntgenovou difrakčnou analýzou:

Molekuly MHC triedy I (HLA alelické varianty: HLA-A, HLA-B, HLA-C) sú exprimované na bunkovom povrchu a sú heterodimérom pozostávajúcim z jedného ťažkého alfa reťazca (45 kDa) nekovalentne spojeného s jednou doménou beta2-mikroglobulín(12 kDa), ktoré sa nachádzajú aj vo voľnej forme v krvnom sére, sa nazývajú klasické transplantačné antigény .

Ťažký reťazec pozostáva z extracelulárnej časti (tvoriacej tri domény: domény alfa1, alfa2 a alfa3), transmembránového segmentu a cytoplazmatickej koncovej domény. Každá extracelulárna doména obsahuje približne 90 aminokyselinových zvyškov a spolu môžu byť oddelené od bunkového povrchu pôsobením papaínu.

Domény alfa2 a alfa3 majú každá jednu vnútroreťazcovú disulfidovú väzbu, ktorá tvorí slučku 63 a 68 aminokyselinových zvyškov.

Doména alfa3 je homológna v sekvencii aminokyselín C-domény imunoglobulínov a konformácia domény alfa3 sa podobá skladanej štruktúre imunoglobulínové domény .

Beta2-mikroglobulín (beta2-m) potrebné na vyjadrenie všetkých Molekuly MHC I. triedy a má nezmenenú sekvenciu, ale u myši sa vyskytuje v dvoch formách, líšia sa nahradením jednej aminokyseliny na pozícii 85. Štruktúrou tento proteín zodpovedá C-doména imunoglobulínov. Beta2-mikroglobulín môže tiež nekovalentne interagovať s neklasické molekuly I. triedy napríklad s CD1 génovými produktmi.

V závislosti od druhu a haplotypu je extracelulárna časť ťažkých reťazcov MHC I. triedy glykozylovaná v rôznej miere.

Transmembránový segment MHC triedy I pozostáva z 25 prevažne hydrofóbnych aminokyselinových zvyškov a pokrýva lipidovú dvojvrstvu, s najväčšou pravdepodobnosťou v alfa-helikálnej konformácii.

Hlavná vlastnosť molekúl triedy I - väzba peptidov (antigénov) a ich prezentácia v imunogénnej forme pre T bunky - závisí od domén alfa1 a alfa2. Tieto domény majú významné alfa-helikálne oblasti, ktoré pri vzájomnej interakcii vytvárajú predĺženú dutinu (štrbinu), ktorá slúži ako väzbové miesto. spracované antigén. Výsledný antigénový komplex s doménami alfa1 a alfa2 určuje jeho imunogenicitu a schopnosť interagovať s receptory rozpoznávajúce antigén na T bunkách .

Trieda I zahŕňa antigény A, antigény AB a antigény AC.

Antigény I. triedy sú prítomné na povrchu všetkých jadrové bunky a krvných doštičiek.

Molekuly MHC triedy II sú heterodiméry vytvorené z nekovalentne spojených ťažkých alfa a ľahkých beta reťazcov.

Množstvo faktov naznačuje úzku podobnosť alfa a beta reťazcov z hľadiska ich všeobecnej štruktúry. Extracelulárna časť každého z reťazcov je zložená do dvoch domén (alpha1, alfa2 a beta1, beta2, v tomto poradí) a spojená krátkym peptidom s transmembránovým segmentom (dĺžka približne 30 aminokyselinových zvyškov). Transmembránový segment prechádza do cytoplazmatickej domény obsahujúcej približne 10-15 zvyškov.

Antigén viažuca oblasť molekúl MHC triedy II je tvorená alfa helikálnymi oblasťami interagujúcich reťazcov ako molekuly I. triedy, avšak s jedným podstatným rozdielom: antigén viažuca dutina molekúl MHC triedy II je tvorená nie dvomi doménami jedného alfa reťazca, ale dvomi doménami rôznych reťazcov – alfa1 a beta1 doménou.

Všeobecná štrukturálna podobnosť medzi týmito dvoma triedami molekúl MHC je evidentná. Ide o jednotnosť priestorovej organizácie celej molekuly, počet domén (štyri), konformačnú štruktúru miesta viažuceho antigén.

V štruktúre molekúl triedy II je dutina viažuca antigén otvorenejšia ako v molekulách triedy I, takže sa do nej zmestia dlhšie peptidy.

Najdôležitejšou funkciou MHC antigénov (HLA) triedy II je poskytovať interakcie medzi T-lymfocytmi a makrofágmi v priebehu imunitnej odpovede. T-pomocníci rozpoznávajú cudzí antigén až po jeho spracovaní makrofágmi v kombinácii s antigénmi HLA triedy II a objavením sa tohto komplexu na povrchu makrofágov.

Antigény triedy II sú prítomné na povrchu B lymfocytov, aktivovaných T lymfocytov, monocytov, makrofágov a dendritické bunky.

Gény MHC triedy II kódujú membránovo viazané transmembránové peptidy (glykoproteíny). Molekuly histokompatibilných antigénov triedy II (DR, DP, DQ), ako aj triedy I, sú heterodimérne proteíny pozostávajúce z ťažkého alfa reťazca (33 kDa) a ľahkého beta reťazca (26 kDa), kódované génmi HLA. komplexné. Oba reťazce tvoria dve domény: alfa1 a alfa2, ako aj beta1 a beta2.

Produkty MHC triedy II sú spojené hlavne s B-lymfocytmi a makrofágmi a slúžia ako rozpoznávacie štruktúry pre T-pomocníkov.

Gény MHC triedy III, ktoré sa nachádzajú v skupine génov MHC alebo sú s ňou úzko spojené, riadia niekoľko zložiek komplementu: C4 a C2, ako aj faktor B, ktoré sa nachádzajú skôr v krvnej plazme než na bunkovom povrchu. A na rozdiel od molekúl MHC triedy I a triedy II sa nezúčastňujú na riadení imunitnej odpovede.

Termín MHC triedy IV sa používa na opis určitých lokusov spojených s MHC.

Štúdium expresie molekúl MHC triedy I a II na rôznych typoch buniek odhalilo širšiu tkanivovú distribúciu molekúl triedy I v porovnaní s molekulami triedy II. Zatiaľ čo molekuly triedy I sú exprimované na takmer všetkých študovaných bunkách, molekuly triedy II sú exprimované hlavne na imunokompetentných bunkách alebo bunkách, ktoré sú relatívne nešpecificky zapojené do tvorby imunitnej odpovede, ako sú epitelové bunky.

V tabuľke. 1 uvádza údaje o povahe tkanivovej distribúcie molekúl MHC u myší a ľudí.

tab. 1 Distribúcia molekúl MHC triedy I a II v tkanivách u myší a ľudí

typ bunky	H-2 komplexné myši		ľudský HLA komplex
typ bunky	trieda I	Trieda II	trieda I	Trieda II
B bunky	+	+	+	+
T bunky	+	(+)	+	(+)
tymocyty	+	(+)	+	(+)
makrofágy	+	+	+	+
Granulocyty	.	.	+	-
Retikulocyty	+	.	+	.
červené krvinky	+	-	-	-
krvných doštičiek	+	-	+	-
fibroblasty	+	-	+	-
epitelové bunky	+	.	+	+
epidermálnych buniek	+	+	+	+
Pečeň	+	-	+	-
Bud	+	-	+	-
srdcový sval	+	-	+	-
Kostrový sval	+	-	+	-
Mozog	+	-	(+)	.
Placenta	+	.	+	.
spermie	+	+	+	+
Oocyty	(+)	.	.	.
trofoblast	-	.	(+)	.
Blastocyty	+	.	.	.
Embryonálne tkanivo	+	.	+	.

Zastúpenie molekúl triedy I na takmer všetkých typoch buniek koreluje s dominantnou úlohou týchto molekúl pri alogénnom odmietnutí štepu. Molekuly triedy II sú menej aktívne v procese odmietnutia tkaniva. Porovnávacie údaje o stupni účasti molekúl I. a II. triedy MHC v niektorých imunitných odpovediach ukazujú, že niektoré vlastnosti MHC sú viac spojené s jednou z tried, zatiaľ čo iné sú charakteristickým znakom oboch tried (tabuľka 2).

Tab. 2 Účasť molekúl MHC triedy I a II na niektorých imunitných odpovediach

Funkcie hlavného histokompatibilného komplexu.

Hoci molekuly MHC boli pôvodne identifikované svojou schopnosťou spôsobiť odmietnutie transplantátu, plnia aj iné biologicky dôležité funkcie v tele. Po prvé, sú priamo zapojené do iniciácie imunitnej odpovede riadením molekúl, ktoré prezentujú antigén v imunogénnej forme na rozpoznanie cytotoxickými T bunkami a pomocnými T bunkami. Po druhé, MHC obsahuje gény, ktoré riadia syntézu imunoregulačných a efektorových molekúl – cytokínov TNF-alfa, TNF-beta a niektorých zložiek komplementu.

Treba poznamenať ich úlohu ako povrchových bunkových markerov rozpoznávaných cytotoxickými T-lymfocytmi a T-pomocníkmi v komplexe s antigénom. Molekuly kódované komplexom Tla (oblasť časti génov MHC) sa podieľajú na procesoch diferenciácie najmä v embryu, prípadne aj v placente. MHC sa podieľa na rôznych neimunologických procesoch, z ktorých mnohé sú sprostredkované hormónmi, ako je regulácia telesnej hmotnosti u myší alebo produkcia vajec u kurčiat. Molekuly MHC triedy I môžu byť súčasťou hormonálnych receptorov. Väzba inzulínu sa teda výrazne zníži, ak sa z bunkového povrchu odstránia antigény MHC triedy I, ale nie antigény triedy II. Okrem toho boli opísané asociácie MHC produktov s glukagónom, epidermálnym rastovým faktorom a gama-endorfínovými receptormi. Na obr. Tabuľka 3 uvádza funkcie produktov MHC a hlavné imunologické vlastnosti spojené s MHC sú uvedené v tabuľke. 3.

ryža. 3 im MHC: funkcie

Tab. 3 Imunologické vlastnosti spojené s MHC

Tieto skutočnosti nás nútia myslieť si, že MHC sa vyvinul a vyvinul špeciálne pre implementáciu imunologických funkcií.

Osobitné miesto zaujíma otázka vzťahu molekúl MHC s chorobami. Pri niektorých formách neprenosných ochorení je frekvencia jednotlivých antigénov medzi pacientmi oveľa vyššia ako v populácii zdravých ľudí. Jasné mechanizmy pre takúto koreláciu nebolo možné stanoviť. Je však zrejmé, že mechanizmy sa pravdepodobne líšia v rôznych formách ochorenia. Pomocou HLA typizácie bolo možné potvrdiť zhodnosť niektorých porúch alebo pristúpiť k problematike ich klasifikácie novým spôsobom. Bol urobený dôležitý záver, že v tele existujú rôzne skupiny MHC antigénov spojených s chorobami. Niektoré z nich sú spojené s rezistenciou alebo, naopak, s náchylnosťou, iné so závažnosťou ich priebehu a napokon ďalšie s dĺžkou života pacientov.

Teraz sa ukázalo, že produkty MHC triedy II sú kritické v patogenéze autoimunitné ochorenia. V tomto ohľade nevyhnutne vznikla túžba spájať autoimunitné ochorenia s imunoreaktívnymi génmi, ktoré riadia odpoveď na zodpovedajúci autoantigén alebo na akékoľvek pravdepodobné etiologické činidlo.

MHC antigény: história výskumu.

V histórii štúdia histokompatibilných antigénov sú najvýznamnejšie tieto štádiá:

1958 - bol objavený prvý ľudský histokompatibilný antigén Mac (HLA-A2, J. Dasse);

1966 - bola preukázaná vedúca úloha HLA antigénov vo vývoji odmietnutia štepu (J. van Ruud et al.);

1972 - bola stanovená korelácia medzi alelickými variantmi HLA antigénov a niektorými chorobami (Z. Falchuk et al.);

1973 - bola stanovená štruktúra antigénov HLA triedy I (K. Nakamura et al.);

1974 - bola preukázaná úloha histokompatibilných antigénov pri obmedzovaní imunitnej odpovede (dvojité rozpoznávanie, R. Zinkernagel, P. Doherty);

1981 - bola vykonaná izolácia a stanovenie aminokyselinovej sekvencie antigénov HLA triedy II (G. Kratzin et al.);

1983 - preukázal biochemický polymorfizmus HLA antigénov (R. Vasilov et al.);

1987 - bola stanovená priestorová štruktúra antigénu HLA-A2 (P. Berkman et al.);

1991-1993 - bola stanovená povaha distribúcie antigénov HLA vo väčšine etnických skupín planéty

Zoznam použitej literatúry.

Immunology, ed. E. S. Voronina, M.: Kolos-Press, 2002
J. Kolman, K.- G. Rem, Vizuálna biochémia, M.: Mir 2000
Sochnev A.M. , Alekseev L.P. ,Tananov A.T. Antigény HLA systému pri rôznych ochoreniach a transplantáciách. – Riga, 1987
www.humbio.ru
www.rusmedserver.ru/med/haris/60.html

Zabezpečujú prezentáciu (prezentáciu) fragmentov antigénov mikroorganizmov vstupujúcich do tela T-lymfocytom, ktoré ničia infikované bunky alebo stimulujú iné bunky (B-bunky a makrofágy), čím sa zabezpečuje koordinácia činnosti rôznych buniek imunitného systému. systém na potlačenie infekcie. U ľudí sa hlavný histokompatibilný komplex nachádza na chromozóme 6 a nazýva sa ľudský leukocytový antigén.

MHC a výber sexuálneho partnera

Množstvo nezávislých štúdií v 70. – 90. rokoch 20. storočia. ukázali, že výber sexuálneho partnera je ovplyvnený hlavným histokompatibilným komplexom. Experimenty vykonané najprv na myšiach a rybách, potom na dobrovoľných ľudských účastníkoch ukázali, že ženy mali tendenciu vyberať si partnerov s MHC odlišných od ich vlastných, avšak v prípade užívania hormonálnej perorálnej antikoncepcie bola ich voľba opačná – v tomto prípade boli ženy viac si pravdepodobne vyberie partnera s podobným GKG

pozri tiež

Poznámky

Odkazy

Literatúra

Meil, D. Immunology / D. Meil, J. Brostoff, D. B. Roth, A. Reutt / Per. z angličtiny. – M.: Logosphere, 2007. – 568 s.
Koiko, R. Immunology / R. Koiko, D. Sunshine, E. Benjamini; za. z angličtiny. A.V. Kamaeva, A.Yu. Kuznecovová, vyd. N.B. Strieborná. -M: Vydavateľské centrum "Akadémia", 2008. - 368 s.

Nadácia Wikimedia. 2010.

Pozrite sa, čo je "Major Histocompatibility Complex" v iných slovníkoch:

- (MHC hlavný histokompatibilný komplex) fam. gény kódujúce molekuly 3 tried. U ľudí je to HLA komplex nachádzajúci sa na 6. chromozóme. Zabezpečuje somatickú individualitu a imunoreaktivitu jedinca. Gény/triedy sú vyjadrené na... Mikrobiologický slovník

hlavný histokompatibilný komplex- - Biotechnologické témy EN hlavný komplex histokompatibility ... Technická príručka prekladateľa

Hlavný komplex histokompatibility, hlavný komplex histokompatibility MHC. Relatívne malá oblasť genómu, ktorá obsahuje množstvo génov, ktorých produkty vykonávajú funkcie spojené s imunitnou odpoveďou

HLAVNÝ KOMPLEX HISTOKOMPATIBILITY (MHC)- komplex génov kódujúcich skupinu proteínov, ktoré zabezpečujú rozpoznávanie cudzích antigénov v organizme, t.j. látky, ktoré nie sú geneticky charakteristické pre tento organizmus. Označenie MHC rôznych živočíšnych druhov je nasledovné: ľudská HLA; BoLA veľké…… Pojmy a definície používané v chove, genetike a reprodukcii hospodárskych zvierat

Množstvo génov umiestnených na chromozóme č. 6, ktoré kódujú niekoľko antigénov, vrátane HLA antigénov; tieto gény hrajú dôležitú úlohu v procese určovania histokompatibility u ľudí. Zdroj: Lekársky slovník... lekárske termíny

KOMPLEX KOMPATIBILITY HISTO HLAV- (major histocompatibility complex, MHC) množstvo génov lokalizovaných na chromozóme č. 6, ktoré kódujú niektoré antigény, vrátane HLA antigénov; tieto gény hrajú dôležitú úlohu v procese určovania ľudskej histokompatibility... Výkladový slovník medicíny

histokompatibilný antigén- * histokompatibilný antigén - geneticky kódovaný aloantigén nachádzajúci sa na povrchu buniek, ktorý riadi odpoveď imunitného systému na transplantát, v dôsledku čoho je alebo nie je odmietnutý (pozri). ... ...

Komplex leukocytového antigénu CLG- komplex leukocytového antigénu, CLG * komplex ľudského leukocytového antigénu alebo HLA c. hlavný komplex génovej histokompatibility (pozri) u ľudí, ktorý zaberá 3500 kb úsek v DNA na krátkom ramene 6. ... genetika. encyklopedický slovník

H2-komplex- * H2 komplex * H2 komplex je hlavný histokompatibilný komplex u myší. Lokalizované na chromozóme 17. Predstavované veľkou skupinou haplotypov ... genetika. encyklopedický slovník

H2 komplex H2 komplex. hlavný histokompatibilný komplex myši; lokalizované na 17. chromozóme, medzi nimi zastúpené veľkou skupinou haplotypov, jedným z najviac preštudovaných sú t haplotypy Molekulárna biológia a genetika. Slovník.

knihy

, Khaitov Rakhim Musaevich , V učebnici sú uvedené orgánové, tkanivové, bunkové a molekulárne aspekty štruktúry a fungovania imunitného systému, zvažujú sa zložky imunitného systému, populácie ... Kategória: Anatómia a fyziológia Vydavateľ: GEOTAR-Media,
Imunológia. Štruktúra a funkcie imunitného systému. Učebnica, Khaitov Rakhim Musaevich, Učebnica predstavuje moderné imunologické poznatky, prijateľné pre biológov, ktorí začínajú študovať predmet, ako aj pre skúsených odborníkov a učiteľov. Prezentované... Kategória:

1646 0

Štruktúra molekuly hlavného histokompatibilného komplexu I. triedy

Na obr. 9.3, A ukazuje všeobecnú schému molekuly hlavný histokompatibilný komplex (MNS)Človek alebo myš triedy I. Každý gén MHC I. triedy kóduje transmembránový glykoproteín s molekulovou hmotnosťou približne 43 kDa, ktorý sa označuje ako a alebo ťažký reťazec. Zahŕňa tri extracelulárne domény: α1, α2 a α3. Každá molekula MHC I. triedy je exprimovaná na bunkovom povrchu v nekovalentnej asociácii s invariantným polypeptidom nazývaným β2-mikroglobulín (β2-m molekulová hmotnosť 12 kDa), ktorý je kódovaný na inom chromozóme.

Ryža. 9.3. Rôzne obrázky molekuly hlavného histokompatibilného komplexu triedy I

Má štruktúru homológnu s jednou Ig doménou a je skutočne členom tejto nadrodiny. Na bunkovom povrchu má teda štruktúra MHC triedy I plus β2m formu štvordoménovej molekuly, v ktorej α3 doména molekuly MHC I. triedy a β2m susedia s membránou.

Sekvencie rôznych alelických foriem molekúl hlavného histokompatibilného komplexu I. triedy sú veľmi podobné. Rozdiely v sekvencii aminokyselín medzi molekulami MHC sú sústredené v obmedzenej oblasti ich al a a2 extracelulárnych domén. Individuálnu molekulu MHC triedy I možno teda rozdeliť na nepolymorfnú alebo invariantnú oblasť (rovnakú pre všetky alelické formy triedy 1) a polymorfnú alebo variabilnú oblasť (jedinečnú sekvenciu pre danú alelu). Molekuly CD8 T-buniek sa viažu na invariantné oblasti všetkých hlavných molekúl histokompatibilného komplexu I. triedy.

Všetky molekuly MHC triedy I podrobené rôntgenovej kryštalografii majú rovnakú všeobecnú štruktúru znázornenú na obr. 9.3, B a C. Najzaujímavejším znakom štruktúry molekuly je, že časť molekuly, ktorá je maximálne vzdialená od membrány, pozostávajúca z domén α1 a α2, má hlbokú drážku alebo dutinu. Táto dutina v molekule MHC triedy I je miestom väzby peptidu. Dutina pripomína kôš s nerovným dnom (utkaný zo zvyškov aminokyselín vo forme plochej β-skladanej štruktúry) a okolité steny predstavujú α-závitnice. Dutina je na oboch koncoch uzavretá, takže sa do nej zmestí reťazec ôsmich alebo deviatich aminokyselinových sekvencií.

Porovnaním sekvencií a štruktúry dutiny v rôznych molekulách hlavného histokompatibilného komplexu I. triedy možno zistiť, že dno každej z nich je odlišné a pozostáva z niekoľkých vreciek špecifických pre každú alelu (obr. 9.3, D). Tvar a náboj týchto vreciek na dne dutiny pomáha určiť, ktoré peptidy sa viažu na každú alelickú formu molekuly MHC. Vrecká tiež pomáhajú ukotviť peptidy v polohe, kde môžu byť rozpoznané špecifickými TCR. Na obr. Obrázky 9.3, D a 8.2 ukazujú interakciu peptidu umiestneného v dutine a rezoch molekuly MHC I. triedy s receptorom T-buniek.

Prepojené peptidové centrum- jediná časť proteínu, ktorá nie je skrytá vo vnútri molekuly hlavného histokompatibilného komplexu - interaguje s CDR3-TCR α a β, ktoré sú najvariabilnejšie v receptore T-buniek. To znamená, že rozpoznanie TCR peptidu vyžaduje kontakt s malým počtom aminokyselín v strede peptidového reťazca.

Jedna molekula MHC I. triedy sa môže viazať na rôzne peptidy, ale hlavne na tie, ktoré majú určité (špecifické) motívy (sekvencie). Takéto špecifické sekvencie sú invariantne lokalizované 8-9 aminokyselinovými zvyškami (ukotvovacie sekvencie), ktoré majú vysokú afinitu k aminokyselinovým zvyškom v dutine viažucej peptid danej molekuly MHC. V tomto prípade môžu byť aminokyselinové sekvencie v polohách, ktoré nie sú kotvami, reprezentované akoukoľvek sadou aminokyselinových zvyškov.

Takže napríklad humánna HLA-A2 molekula I. triedy sa viaže na peptidy, ktoré majú leucín na druhej pozícii a valín na deviatej pozícii; na rozdiel od toho druhá HLA-A molekula viaže iba proteíny, ktorých kotviaca sekvencia zahŕňa fenylalanín alebo tyrozín v polohe 5 a leucín v polohe 8. Ostatné polohy vo väzbových peptidoch môžu byť vyplnené akýmikoľvek aminokyselinami.

Každá z molekúl hlavného histokompatibilného komplexu sa teda môže viazať na veľké množstvo peptidov s rôznymi aminokyselinovými sekvenciami. To pomáha vysvetliť, prečo sa T-bunkami sprostredkované reakcie môžu vyvinúť, až na zriedkavé výnimky, na aspoň jeden epitop takmer všetkých proteínov a prečo sú prípady neimunitnej reakcie na proteínový antigén veľmi zriedkavé.

Štruktúra molekúl hlavného histokompatibilného komplexu triedy II

Gény a a p MHC triedy II kódujú reťazce s hmotnosťou približne 35 000 a 28 000 Da. Na obr. 9.4, A ukazuje, že molekuly MHC triedy II, podobne ako trieda I, sú transmembránové glykoproteíny s cytoplazmatickými "chvostmi" a extracelulárnymi doménami podobnými Ig; domény sú al, α2, β1 a β2.

Molekuly hlavného histokompatibilného komplexu triedy II sú tiež členmi nadrodiny imunoglobulínov. Ako pri molekulách MHC I. triedy, molekuly MHC II. triedy zahŕňajú variabilné alebo polymorfné (rôzne pre rôzne alely) a nemenné alebo nepolymorfné (spoločné pre všetky alely) oblasti. Molekula T-buniek CD4 je pripojená k invariantnej časti všetkých molekúl hlavného histokompatibilného komplexu triedy II.

Ryža. 9.4. Rôzne obrázky molekuly hlavného histokompatibilného komplexuII triedy

V hornej časti molekuly MHC triedy II je tiež vybranie alebo dutina schopná viazať sa na peptidy (obr. 9.4, B a C), ktorá je štruktúrne podobná dutine molekuly MHC triedy I. Avšak v molekule hlavného histokompatibilného komplexu triedy II je dutina vytvorená interakciou domén rôznych reťazcov a a p. Na obr. 9.4, B ukazuje, že spodná časť dutiny molekuly MHC triedy II pozostáva z ôsmich β-záhybov, pričom domény al a β1 tvoria každá štyri z nich; helikálne fragmenty domén al a p1 tvoria každý jednu stenu dutiny.

Na rozdiel od dutiny molekuly MHC triedy I je dutina molekuly MHC triedy II obojstranne otvorená, čo umožňuje väzbu väčších molekúl proteínov. Dutina molekuly MHC triedy II teda môže viazať peptidy, ktorých dĺžka sa pohybuje od 12 do 20 aminokyselín v lineárnom reťazci, pričom konce peptidu sú mimo dutiny. Na obr. 9.4, D ukazuje, že TCR interaguje nielen s peptidom spojeným s molekulou MHC triedy II, ale aj s fragmentmi samotnej molekuly MHC triedy II.

Peptidy, ktoré sa viažu na rôzne molekuly MHC triedy II, musia mať tiež určité motívy (sekvencie); Pretože dĺžka peptidov je v tomto prípade variabilnejšia ako dĺžka peptidov, ktoré môžu byť pripojené k molekule MHC I. triedy, motívy sú častejšie umiestnené v centrálnej oblasti peptidu; v mieste, ktoré zodpovedá vnútornému povrchu dutiny molekuly hlavného histokompatibilného komplexu triedy II.

R. Koiko, D. Sunshine, E. Benjamini

GOU VPO Štátna lekárska akadémia v Tveri Ministerstva zdravotníctva Ruska Oddelenie klinickej imunológie s alergológiou

HLAVNÝ KOMPLEX HISTO KOMPATIBILITY

Učebná pomôcka pre všeobecnú imunológiu. Tver 2008.

Produkty

Vzdelávací a metodický rozvoj pre praktické vyučovanie zo všeobecnej imunológie pre študentov 5. ročníka lekárskej a pediatrickej fakulty, ako aj pre klinických rezidentov a lekárov so záujmom o imunológiu.

Zostavil docent Yu.I. Budchanov.

Vedúci katedry, profesor A.A. Mikhailenko

Motivácia Imunogenetika je nový a dôležitý odbor imunológie. Znalosť systému histokompatibility

je potrebná nielen v transplantológii, ale aj na pochopenie regulácie imunitnej odpovede a interakcie buniek v imunitnej odpovedi. Stanovenie HLA antigénov sa využíva v súdnom lekárstve, populačných genetických štúdiách a pri štúdiu génu predispozície k ochoreniam.

1. Žiak musí poznať: A. Štruktúru ľudského HLA systému.

B. HLA antigény triedy I, II a ich úloha v medzibunkových interakciách. B. Pojmy genotyp, fenotyp, haplotyp.

D. Význam typizácie HLA v medicíne.

E. Vzťah medzi HLA antigénmi a množstvom ľudských chorôb. 2. Študent musí byť schopný:

Aplikovať získané poznatky z imunogenetiky v klinickej praxi.

Otázky na vlastnú prípravu na tému lekcie:

1. Koncept génov a antigénov histokompatibility. HLA ľudský systém. Nomenklatúra, organizácia génov (gény tried I, II, III).

2. Antigény triedy I a III, ich úloha v medzibunkových interakciách, pri prezentácii antigénov T-lymfocyty, vo fenoméne dvojitého rozpoznávania.

3. Pojem HLA fenotyp, genotyp, haplotyp. Vlastnosti dedičnosti.

4. Metódy výskumu a typizácie HLA systému: sérologické, bunkami sprostredkované, génové (polymerázová reťazová reakcia, DNA sondy).

5. Praktické aspekty typizácie HLA antigénov. HLA v populáciách, biologický význam.

6. HLA a ľudské choroby, asociačné mechanizmy.

LITERATÚRA PRE SEBAVZDELÁVANIE

1. Khaitov R.M., Ignatieva G.A., Sidorovič I.G. Imunológia. Norma a patológia. Učebnica. - 3

vyd., M., Medicína, 2010. - 752 s. – [str.241 - 263].

2. Khaitov R.M. Imunológia: učebnica pre študentov medicíny. – M.: GEOTAR-Media, 2006. - 320s. - [S. 95-102].

3. Belozerov E.S. Klinická imunológia a alergológia. A-Ata., 1992, str. 31-34.

4. Zaretskaya Yu.M. Klinická imunogenetika. M., 1983.

5. Metodický vývoj. 6. Prednáška.

doplnková literatúra

Konenkov V.I. Lekárska a ekologická imunogenetika. Novosibirsk, 1999 Yarilin A.A. Základy imunológie. M., 1999, s. 213-226.

Alekseev L.P., Khaitov R.M. HLA a medicína. So. Moderné problémy alergológie, imunológie a imunofarmakológie. M., 2001, s. 240-260.

MÔŽETE ODPOVEDAŤ?

(Zadajte sa doma. Sebakontrola identifikuje ťažké otázky na diskusiu. Na hodine si skontrolujete správnosť odpovedí, doplníte ich. Pokúste sa nájsť odpovede sami a ukážte, že to dokážete.)

1. V ktorom páre chromozómov sa nachádza hlavný histokompatibilný komplex u ľudí? ………………….

2. Bunky ktorých orgánov a tkanív obsahujú transplantované bunky? …………antigény

……………………………………………………………………………….……………………. .

3. Čo znamená skratka HLA? ………………………………………………………………………………….

………………………………………………………………………………………… .

4. Na ktorých bunkách sa antigény systému HLA nenachádzajú? ………………….…

…………………………………………………………………………………………. .

5. Z akých lokusov, sublokusov pozostáva MCGS: Trieda I ……..……… Trieda II ………………………………

Stupeň III ………………………………………….. .

6. Génové produkty akej triedy MHC nie sú exprimované na bunkovej membráne? ………………………….

7. Aké bunky by sa mali izolovať na detekciu HLA triedy II? …………………………………………….

8. Ako sa zisťujú antigény HLA? …………………………………………………………………

………………………………………………………………………………………….. .

9. Typizovaný pacient má 6 možných antigénov HLA-A, HLA-B, HLA-C. Ako sa volá takáto situácia? ………………………………….

10. Aký histokompatibilný antigén sa často vyskytuje u pacientov s ankylozujúcou spondylitídou?

…………………….. .

11. Aké gény sú zahrnuté v HLA triedy III? …………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………… .

12. Aké reťazce tvoria antigény HLA triedy I? ………………….

13. Z akých reťazcov pozostávajú antigény HLA triedy II? …………………

14. Cytotoxický lymfocyt (CD8) rozpoznáva cudzí peptid v komplexe s HLA akej triedy?

…………………………. .

15. Th (CD4+) rozpoznáva cudzí antigén prezentovaný dendritickou bunkou alebo makrofágom v kombinácii s HLA akej triedy? …..………

Aké sú možné kombinácie antigénov erytrocytov u dieťaťa, ak je izoantigénne zloženie

erytrocyty
Otec: AO, NM, ss, dd, Cc, Ee,		a matky: AB, MM, SS, DD, Cc, EE.
Vyber správnu odpoveď.
	AO, MN, Ss, DD, CC, EE
	AA, MM, Ss, Dd, cc, ee
	OO, NN, Ss, Dd, CC, Ee
	AB, MN, Ss, Dd, cc, EE
	AO, NN, Ss, Dd, Cc, EE
	AB, MM, SS, Dd, cc, Ee
Napíšte ďalšiu správnu odpoveď ___, ___, ___, ___, ___, ___.			Môžete urobiť viac?
Ako? …………. .

Referenčné a teoretické materiály

Major Histocompatibility Complex (MHC) je systém génov, ktoré riadia syntézu antigénov, ktoré určujú histokompatibilitu tkaniva počas transplantácie orgánov a vyvolávajú reakcie, ktoré spôsobujú odmietnutie transplantátu. Povrchové štruktúry cytomembrány buniek, ktoré vyvolávajú reakcie

odmietnutie, dostal meno histokompatibilné antigény, a gény, ktoré ich kódujú, sa nazývali gény histokompatibility – H-gény (Histocompatibility). Objav histokompatibilných antigénov slúžil ako základ pre rozvoj transplantačnej imunológie.

Následne sa dokázalo, že hlavný komplex histokompatibility je

hlavný genetický systém, ktorý určuje fungovanie imunitného systému,

najmä T-systém imunitného systému. GCGC reguluje imunitnú odpoveď,et zakóduje schopnosť rozpoznať „svoje“ a „cudzie“, odmietnuť cudzie bunky, schopnosť syntetizovať množstvo

Klasické antigény HLA systému sa v tukovom tkanive a na erytrocytoch, ako aj na neurónoch a trofoblastových bunkách vôbec nedetekujú.

		SCHÉMA UMIESTNENIA GÉNOV SYSTÉMU HLA
		NA CHROMOZÓME 6




DP LMP TAP DQ DR		C2 Bf C4b C4a TNF

U ľudí sa hlavný systém histokompatibility nazýva systém HLA (Human Leukocyte Antigens). Ide o systém génov, ktoré riadia syntézu histokompatibilných antigénov. Pozostáva z troch oblastí umiestnených na krátkom ramene 6. chromozómu. Tieto oblasti sa nazývajú: trieda 1, trieda 2, trieda 3 (trieda I, trieda II, trieda III) Oblasť zahŕňa gény alebo lokusy. Názov každého génu HLA obsahuje písmenové označenie lokusu (A, B, C) a sériové číslo, napríklad: HLA-A3, HLA-B27, HLA-C2 atď. Antigény kódované génom majú tiež rovnaké označenie.. V lokuse D boli identifikované 3 sublokusy (DP, DQ, DR). (Pozri diagram vyššie). Na zozname schválenom WHO je 138 antigénov HLA. (Používanie typizácie DNA, teda schopnosť študovať samotné gény, však viedlo len v posledných rokoch k identifikácii viac ako 2000 alel).

Trieda I zahŕňa lokusy HLA - A, -B a -C. Tieto tri lokusy ľudského hlavného histokompatibilného komplexu riadia syntézu transplantačných antigénov, ktoré je možné stanoviť sérologickými metódami (CD - Serological Determined). Molekuly antigénov HLA triedy I pozostávajú z 2 podjednotiek: α- a β-reťazca (pozri obrázok). Ťažký alebo a-reťazec pozostáva z 3 extracelulárnych fragmentov – domén al, α2 a α3 (extracelulárne domény), malej oblasti patriacej bunkovej membráne (transmembránová oblasť) a intracelulárneho fragmentu (cytoplazmatická oblasť). Ľahký reťazec je β2-mikroglobulín, nekovalentne naviazaný na a-reťazec a neviazaný na bunkovú membránu.

Domény al a a2 tvoria vybranie, v ktorom sa môže nachádzať peptid (oblasť antigénu) dlhý 8 až 10 aminokyselín. Táto depresia sa nazýva štrbina viažuca peptid(z angl. cleft).

(Nové antigény HLA triedy I objavené nedávno zahŕňajú antigény MIC a HLA-G. V súčasnosti je o nich málo známe. Treba poznamenať, že HLA-G, ktorý sa nazýva neklasický, bol identifikovaný iba

na povrchu buniek trofoblastu a poskytuje matke imunologickú toleranciu voči fetálnym antigénom.)

Oblasť 2. triedy (D-oblasť) systému HLA pozostáva z 3 sublokusov: DR, DQ, DP, kódujúcich transplantačné antigény. Tieto antigény patria do kategórie antigénov detegovaných bunkami sprostredkovanými metódami, a to reakciou zmiešanej lymfocytovej kultúry (anglická zmiešaná lymfocytová kultúra - MLC). Nedávno boli izolované lokusy HLA-DM a -DN, ako aj gény TAP a LMP (neexprimované na bunkách). Klasické sú DP, DQ, DR.

Prezentovaný peptid je znázornený červenou farbou.

Nedávno boli získané protilátky, ktoré dokážu identifikovať antigény DR a DQ. Preto sú antigény 2. triedy v súčasnosti určované nielen bunkami sprostredkovanými metódami, ale aj sérologicky, ako aj HLA antigény 1. triedy.

Molekuly HLA triedy 2 sú heterodimérne glykoproteíny pozostávajúce z dvoch rôznych α a β reťazcov (pozri obrázok). Každý reťazec obsahuje 2 extracelulárne domény al a β1 na N-terminálnom konci, α2 a β2 (bližšie k bunkovej membráne). Existujú tiež transmembránové a cytoplazmatické oblasti. Domény a1 a p1 tvoria vybranie, ktoré môže viazať peptidy dlhé až 30 aminokyselinových zvyškov.

Proteíny MHC-II nie sú exprimované vo všetkých bunkách. Molekuly HLA triedy II sú prítomné vo veľkých množstvách na dendritických bunkách, makrofágoch a B-lymfocytoch, t.j. na tie bunky, ktoré interagujú s pomocnými T-lymfocytmi počas imunitnej odpovede, pomocou

Molekuly HLA triedy II

T-lymfocyty

významné množstvo

antigény 2. triedy, ale pri stimulácii mitogénmi IL-2

začnú exprimovať molekuly HLA triedy 2.

Nevyhnutné

Mark,

všetky 3 typy interferónov

výrazne zlepšiť

výraz

HLA molekuly 1

na bunkovej membráne rôznych buniek. Takže

y-interferón v

významne zvyšuje expresiu molekúl 1. triedy na T- a B-lymfocytoch, ale aj na bunkách malígnych nádorov (neuroblastóm a melanóm).

Niekedy sa zistí vrodená porucha v expresii molekúl HLA 1. alebo 2. triedy, čo vedie k rozvoju „ syndróm nahého lymfocytu v". Pacienti s takýmito poruchami trpia nedostatočnou imunitou a často zomierajú v detstve.

Oblasť triedy III obsahuje gény, ktorých produkty sa priamo podieľajú na imunitnej odpovedi. Zahŕňa štrukturálne gény pre zložky komplementu C2 a C4, gény Bf (properdin faktor) a tumor nekrotizujúci faktor-TNF (TNF). To zahŕňa gény kódujúce syntézu 21-hydroxylázy. Produkty génu HLA 3. triedy teda nie sú exprimované na bunkovej membráne, ale sú vo voľnom stave.

HLA-antigénne zloženie ľudských tkanív je určené alelickými, génmi súvisiacimi s každým z lokusov, t.j. jeden chromozóm môže mať iba jeden gén z každého lokusu.

V súlade so základnými genetickými zákonitosťami je nositeľom každý jedinec nie viac ako dve alely každého lokusu a sublokusy (jeden na každom z párových autozomálnych chromozómov). Haplotyp (súbor alel na jednom chromozóme) obsahuje jednu alelu každého z HLA sublokusov. Zároveň, ak je jedinec heterozygotný pre všetky alely HLA komplexu, pri typizácii sa u neho nezistí viac ako dvanásť HLA antigénov (A, B, C, DR, DQ, DP - sublokusy). Ak je jedinec homozygotný pre niektoré antigény, zistí sa u neho menší počet antigénov, tento počet však nemôže byť menší ako 6.

Ak má typizovaný subjekt maximálny možný počet antigénov HLA, nazýva sa to „full house“ („plný dom“ antigénov).

K dedičnosti HLA génov dochádza podľa kodominantného typu, v ktorom sa potomstvo v

Najbohatšie na HLA antigény sú lymfocyty. Preto sa detekcia týchto antigénov uskutočňuje na lymfocytoch. ( Pamätajte si, ako izolovať lymfocyty z periférnej krvi).

Molekuly antigénov HLA-A, -B, -C tvoria asi 1 % bielkovín na povrchu lymfocytov, čo je približne rovných 7 tisíc molekúl.

Jedným z najvýznamnejších pokrokov v imunológii bolo objavenie ústrednej úlohy, ktorú zohráva MHC u cicavcov a ľudí pri regulácii imunitnej odpovede. V prísne kontrolovaných experimentoch sa ukázalo, že ten istý antigén spôsobuje v organizmoch s rôznymi genotypmi imunitnú odpoveď rôznej výšky a naopak, ten istý organizmus môže byť v rôznej miere reaktívny vzhľadom na rôzne antigény. Gény, ktoré riadia túto vysoko špecifickú imunitnú odpoveď, sa nazývajú Ir-gény (gény imunitnej odpovede). Sú lokalizované v oblasti 2. triedy ľudského HLA systému. Kontrola Ir-génu sa realizuje prostredníctvom -T systému lymfocytov.


Centrálne		bunkový	interakcie			imúnny	odmietaš
interakcia		HLA molekuly,		vyjadrený				povrchy
antigén prezentujúce bunky		zastupujúci		na uznanie		Votrelec		antigénne
peptid a receptor rozpoznávajúci antigén - TCR (T-bunkový receptor)					na povrchu T-lymfocytu
pomocníka. O	súčasne		uznanie		Votrelec			deje

rozpoznávanie vlastných HLA antigénov.

Pomocník T-lymfocytov (CD4+) rozpoznáva cudzí antigén iba v komplexe s povrchovými molekulami buniek prezentujúcich antigén MHC triedy 2.

Cytotoxické lymfocyty (T-efektory, CD8+) rozpoznať antigén

napríklad vírusovej povahy, v kombinácii s HLA molekulou I. triedy cieľovej bunky. Exogénne antigény predstavujú molekuly HLA II. triedy,

endogénne - molekuly I. triedy.

(Proces cudzieho rozpoznávania je teda obmedzený vlastnými HLA antigénmi. Ide o koncept „dvojitého rozpoznávania“ alebo „zmeneného sebarozpoznania“.)

Dôležitou úlohou systému HLA je tiež to, že riadi syntézu faktorov komplementu zapojených do klasickej (C2 a C4) aj alternatívnej (Bf) dráhy aktivácie komplementu. Geneticky podmienený nedostatok týchto zložiek komplementu môže predisponovať k infekčným a autoimunitným ochoreniam.

Praktická hodnota typizácie HLA. Vysoký polymorfizmus robí z HLA systému vynikajúci marker v populačných genetických štúdiách a štúdiu genetickej predispozície k chorobám, no zároveň vytvára problémy pri výbere párov darca – príjemca pri transplantácii orgánov a tkanív.

Populačné štúdie uskutočnené v mnohých krajinách sveta odhalili charakteristické rozdiely v distribúcii HLA antigénov v rôznych populáciách. Vlastnosti distribúcie HLA-

antigény sa používajú v genetickom výskume na štúdium štruktúry, pôvodu a vývoja rôznych populácií. Napríklad gruzínska populácia, patriaca k južným Kaukazom, má podobné črty genetického profilu HLA ako grécka, bulharská a španielska populácia, čo naznačuje spoločný pôvod.

Typizácia antigénov HLA je široko používaná vo forenznej praxi na vylúčenie alebo stanovenie otcovstva alebo príbuzenstva.

Venujte pozornosť súvislosti niektorých ochorení s prítomnosťou jedného alebo druhého antigénu HLA v genotype. Je to preto, že HLA sa široko používa na štúdium genetického základu predispozícia k chorobe. Ak sa predtým napríklad nepredpokladalo, že ochorenie roztrúsenej sklerózy má dedičný základ, teraz je vďaka štúdiu prepojenia s HLA systémom pevne stanovený fakt dedičnej predispozície. Použitím


	systém HLA, pri niektorých ochoreniach sa určuje aj spôsob dedičnosti.
Napríklad,	ankylozujúci		spondylitída		autozomálne dominantné		dedičstvo,
hemochromatóza a kongenitálna adrenálna hyperplázia - autozomálne recesívne. Ďakujem veľmi pekne
	združenia	ankylozujúci		spondylitída		HLA-B27 antigén, HLA typizácia

používa sa pri diagnostike skorých a nejasných prípadov tohto ochorenia. Boli identifikované genetické markery inzulín-dependentného diabetes mellitus.

PRAKTICKÁ PRÁCA

Stanovenie HLA antigénov "u darcov"

Typizácia tkanivových antigénov sa vykonáva pomocou sady sér, ktoré pozostávajú z 50 alebo viacerých antileukocytových sér (séra multipar, ktoré poskytujú 10 až 80 % pozitívnych reakcií s fetálnymi leukocytmi, alebo séra imunizovaných dobrovoľníkov

človek	obsahujúce leukocyty			niektoré SD antigény.		Séra
viacrodičiek, v dôsledku prirodzenej imunizácie manželovými HLA antigénmi počas
tehotenstva, obsahujú v niektorých prípadoch protilátky proti HLA v dostatočne vysokom titri.).
Sérologicky		antigény		histokompatibilita		definovať
lymfocytotoxický		test (anglicky)	test lymfocytotoxicity).				volal
mikro lymfocytotoxický			použitie		inscenovanie		mikroobjem
prísad.

Jej princíp je založený na interakcii HLA molekúl na povrchu lymfocytov vyšetrovanej osoby so špecifickými anti-HLA protilátkami a komplementom, čo vedie k bunkovej smrti. Bunková smrť sa stanoví konvenčnou svetelnou mikroskopiou po farbení vitálnymi farbivami.

Suspenzie lymfocytov sa zmiešajú s antisérom na určitý antigén (HLA-B8, HLA-B27 a pod.), inkubujú sa 1 hodinu pri 25 C, pridá sa komplement a opäť sa inkubuje 2 hodiny pri 37 C a potom trypánová modrá resp. pridáva sa eozín. Ak je v lymfocytoch prítomný antigén zodpovedajúci protilátkam obsiahnutým v sére, protilátky v prítomnosti komplementu poškodzujú membránu leukocytov, farbivo preniká do ich cytoplazmy a farbia sa na modro alebo na červeno (ak bol použitý eozín).

Aké bunky budú zafarbené typizáciou HLA?

Na základe výsledkov typizácie sa stanoví stupeň kompatibility darcu a príjemcu a možnosť transplantácie orgánu alebo tkaniva medzi nimi. Darca a príjemca musia byť kompatibilní z hľadiska erytrocytových antigénov ABO a Rh, leukocytárnych antigénov HLA systému. V praxi je však ťažké nájsť úplne kompatibilného darcu a príjemcu. Výber je zredukovaný na výber najvhodnejšieho donóna. Transplantácia je možná s

inkompatibilita pre jeden z HLA antigénov, ale na pozadí výraznej imunosupresie. Výber optimálneho pomeru histokompatibilných antigénov medzi darcom a príjemcom výrazne predlžuje životnosť štepu.

V lekcii sa predvedú HLA platničky na typizáciu leukocytov. Pripomeňme si, ako získať čistú suspenziu lymfocytov z buniek periférnej krvi. Zamyslite sa nad tým, ako ochrániť obsah jamiek pred vyschnutím počas reakcie? Ako sa získavajú séra na typizáciu HLA?

V súčasnosti možno na typizáciu komplementu použiť monoklonálne protilátky fixujúce komplement (MAT). Používajú sa ako pri teste mikrolymfocytotoxicity, tak aj pri imunofluorescenčnom teste. Posúdenie reakcie je možné ako pomocou luminiscenčnej mikroskopie, tak aj pomocou prietokového cytometra.

		moderná metóda		stanovenie HLA génov typizácia DNA. On
založené na rôznych variantoch polymerázovej reťazovej reakcie (PCR) a molekulárnej hybridizácie.
	tieto metódy		leží v	hromadenie potrebného	analýza významných
množstvo			jeho polymerizácia a pri použití komplementárne sondy
analyzované úseky DNA. Navyše jednou z výhod typizácie DNA je, že to tak nie je
vyžaduje sa prítomnosť životaschopných lymfocytov a využíva sa DNA akýchkoľvek buniek. ale
DNA sa môže uchovávať roky alebo desaťročia. Vyžaduje sa pre reakciu					drahé

oligonukleotidové sondy, priméry.

Využitie molekulárno-genetickej metódy – typizácia DNA, umožnilo výrazne rozšíriť chápanie polymorfizmu doteraz známych genetických lokusov systému HLA-A, B, C, DR, DQ, DP. Okrem toho boli objavené nové gény, najmä TAP, DM, LMP a iné. Boli objavené gény HLA triedy I - E, F, G, H, ale funkcia ich produktov je stále nejasná. K decembru 1998 bol počet identifikovaných alel génov komplexu HLA 942. K 31. decembru 2000 bolo molekulárne genetickou typizáciou DNA identifikovaných 1349 alel a ich detekcia neustále rastie.

NOVÁ NOMENKLATÚRA HLA. Ako už bolo uvedené, molekuly HLA triedy 1 pozostávajú z a- a p-reťazcov. A je len polymorfnýα-reťazec.piAlelické varianty kódujúcich génov dostali v novej nomenklatúre štvormiestny názov (napríklad HLA-A0201 namiesto doteraz používaného označenia HLA-A2 a 12 (!) nových podtypov tohto antigénu (nové alelické varianty ) boli identifikované metódami molekulárnej biológie, ktoré dostali názov A0201, A0202, A0203, ... až A0212). HLA-B27 má 9 variantov alelickej špecifickosti a len niektoré z nich sú spojené s ankylozujúcou spondylitídou (to samozrejme zvyšuje ich prognostickú hodnotu).

Efektívnosť alogénnej transplantácie obličky (podľa výsledkov ročného prežívania v transplantačných centrách, ktoré prešli na selekciu darcu na základe molekulárno-genetickej

koordinačné centrum pre darcovstvo orgánov a Ústav imunológie.

Ešte pôsobivejšie údaje získané za posledné 2-3 roky v priebehu národných (predovšetkým v Spojených štátoch) a medzinárodných programov transplantácie alogénnej, „nepríbuznej“ kostnej drene. Vďaka prechodu selekcie párov darca-príjemca na typizáciu -DNA a vytvoreniu banky HLA-genotypovaných darcov vrátane 1,5 milióna ľudí sa ročná miera prežitia transplantovanej kostnej drene zvýšila o 10 s -20 % na 70-80% (!). To zase viedlo k počet transplantácií kostnej drene od nepríbuzných darcov v Spojených štátoch (ktoré majú v súčasnosti najväčší počet genotypovaných darcov a príjemcov) v rokoch 1993 až 1997. zvýšili viac ako 8-krát. Ohromujúci

Účinok nepríbuzných transplantácií kostnej drene sa dosahuje výlučne výberom plne HLA kompatibilných párov darca-príjemca pomocou typizácie DNA.

Nasleduje úryvok z knihy akademika R.V. Petrova „Ja alebo nie ja: Imunologické mobily“. M., 1983. - 272 s.

Karl Landsteiner po prevzatí Nobelovej ceny v roku 1930 vo svojej slávnostnej prednáške na túto tému povedal, že objavenie stále nových antigénov v bunkách ľudského tkaniva by

teoretický záujem. Okrem iných praktických aplikácií našiel aj forenzné aplikácie.

Predstavte si nasledujúcu situáciu: je potrebné určiť identitu krvnej škvrny. Koho je to krv - ľudská alebo zvieracia? Netreba vysvetľovať, že táto situácia sa najčastejšie týka kriminalistiky. A riešenie problému sa často stáva odpoveďou na hlavné otázky vyšetrovania. Jediný spôsob, ako na to odpovedať, je pomocou imunitných sér. V žiadnom prípade

iné ukazovatele na rozlíšenie krvi človeka a napríklad psa je nemožné. Mikroskopické alebo biochemické metódy výskumu sú bezmocné.

Súdni lekári majú vo svojom arzenáli súbor imúnnych sér rôznej špecifickosti: proti ľudským, konským, slepačím, psím, kravským, mačacím atď. proteínom. Študovaná škvrna sa zmyje a potom sa zavedú zrážacie reakcie. V tomto prípade sa používa celá sada imunitných sér. Ktoré sérum spôsobí zrážanie, typ zvieraťa alebo osoby patrí do krvi skúmaného miesta.

Povedzme, že kriminalista na záver: "Nôž je zafarbený ľudskou krvou." A podozrivý z vraždy hovorí: „Áno. Ale toto je moja krv. Nie je to tak dávno, čo som si týmto nožom porezal prst. Potom vyšetrenie pokračuje. Na stole kriminalistov sa objavujú antiséra proti krvným skupinám a HLA antigénom. A imunológia opäť dáva presnú odpoveď: krv patrí do skupiny AB, obsahuje M faktor, Rh-negatívny, histokompatibilné antigény také a onaké atď. Situácia je konečná

vysvetlil. Výsledná charakteristika sa úplne zhoduje s antigénnymi charakteristikami krvi podozrivého. Preto povedal pravdu, je to skutočne jeho krv.

Zastavme sa ešte pri jednej situácii, ktorá má veľkú morálnu konotáciu. Predstavte si, že vojna alebo iná katastrofa oddelila rodičov od ich detí. Deti prišli o mená a priezviská. Je naozaj nemožné nájsť svoje dieťa medzi ostatnými? Antigény erytrocytov a HLA sa totiž dedia. A ak faktor nemajú otec a matka, nemôže ho mať ani dieťa. Naopak, ak obaja rodičia patria do skupiny A, potom dieťa nemôže mať krvnú skupinu B alebo AB. To isté platí pre HLA antigény. A s veľmi vysokou mierou istoty.“

Overenie pravosti pozostatkov členov kráľovskej rodiny Mikuláša II sa uskutočnilo týmto spôsobom pomocou typizácie DNA.

napríklad v Anglicku sú otázky určovania otcovstva obzvlášť úzkostlivé. Ale tam sa to najčastejšie spája nie s vojnou. Prísne zákony o otcovstve vysvetľujú prísne zákony o dedičoch a dedičských právach stolíc, titulov, práv, výsad.

Predstavte si, že pán vyhlási za svojho dediča mladého muža, ktorého nenosila jeho manželka. Potom môže byť potrebné dokázať, že mladý muž je jeho syn. Alebo sa zrazu objaví pán, ktorý sa vyhlási za nemanželského syna, a teda dediča milionára. Môže to byť pravda, ale môže sa stať, že tento pán je podvodník. Otázku rieši analýza antigénov rodičov a detí.

Distribúcia HLA antigénov sa ukázala byť odlišná u predstaviteľov rôznych rás národností. Od roku 1966 sa vo všetkých krajinách sveta uskutočňuje intenzívna štúdia štruktúry antigénov tkanivovej kompatibility, ktorú iniciovala WHO. Čoskoro bola mapa sveta pokrytá imunologickými hieroglyfmi, ktoré ukazovali, kde a v akej kombinácii sa nachádzajú antigény.

HLA. Teraz snáď netreba, ako Thor Heyerdahl, vybaviť výpravu na trstinovom člne, aby dokázal migráciu obyvateľstva z Južnej Ameriky na ostrovy Polynézie. Stačí sa pozrieť do moderného atlasu distribúcie HLA antigénov a s istotou povedať, že v oboch týchto geografických oblastiach existujú spoločné genetické markery.

Polymorfizmus klasických HLA - antigénov detekovaných sérologickými a bunkami sprostredkovanými metódami

Na cytoplazmatických membránach takmer všetkých buniek makroorganizmu, histokompatibilné antigény. Väčšina z nich patrí do systémuhlavná komhistokompatibilný plex, alebo WPC(skrátene z angl. Hlavné Hystokompatibilita Komplexné).

Histokompatibilné antigény hrajú kľúčovú úlohu pri implementácii špecifických uznanie "priateľa alebo nepriateľa" a indukcia získanej imunitnej odpovede. Určujú kompatibilitu orgánov a tkanív počas transplantácie v rámci toho istého druhu, genetické obmedzenie (obmedzenie) imunitnej odpovede a ďalšie účinky.

Veľké zásluhy o štúdium MNS ako fenoménu biologického sveta majú J. Dosse, P. Doherty, P. Gorer, G. Snell, R. Zinkernagel, R. V. Petrov, ktorí sa stali zakladateľmi imunogenetika.

MHC bol prvýkrát objavený v 60. rokoch minulého storočia. v pokusoch na geneticky čistých (inbredných) líniách myší pri pokuse o medzilíniovú transplantáciu nádorových tkanív (P. Gorer, G. Snell). U myší bol tento komplex nazvaný H-2 a bol mapovaný na 17. chromozóm.

U ľudí bol MHC popísaný o niečo neskôr v prácach J. Dosseho. Bol označený ako HLA (skrátene z angl.človek Leukocyt Antigén ), pretože je spojená s leukocytmi.

BiosyntézaHLAdeterminované génmi, lokalizované naraz vo viacerých lokusoch krátkeho ramena 6. chromozómu.

MHC má zložitú štruktúru a vysoký polymorfizmus. Chemicky sú histokompatibilné antigény glykoproteíny, pevne viazané na cytoplazmumatická membrána buniek. Ich jednotlivé fragmenty sú štruktúrna homológia s molekulami imunoglobulínu a preto patria k tomu istému nadrodina.

Rozlišovať dve hlavné triedy molekúl MHC.

Bežne sa uznáva, že MHC I. triedy indukuje prevažne bunkovú imunitnú odpoveď.

MHC triedy II - humorálna.

Hlavné triedy zjednocujú mnohé antigény podobnej štruktúry, ktoré sú kódované mnohými alelickými génmi. Zároveň sa na bunkách jedinca nemôžu exprimovať viac ako dve odrody produktov každého génu MHC, čo je dôležité pre udržanie heterogenity populácie a prežitie jedinca aj celej populácie ako celku.

WPCjatrieda pozostáva z dvoch nekovalentne spojených polypeptidových reťazcov s rôznymi molekulovými hmotnosťami: ťažkého alfa reťazca a ľahkého beta reťazca. Alfa reťazec má extracelulárnu oblasť s doménovou štruktúrou (al-, a2- a a3-domény), transmembránovú a cytoplazmatickú. Beta reťazec je beta-2 mikroglobulín, ktorý sa "prilepí" na doménu a3 po expresii alfa reťazca na cytoplazmatickej membráne bunky.

Alfa reťazec má vysokú sorpčnú kapacitu pre peptidy. Túto vlastnosť určujú al- a a2-domény, ktoré tvoria takzvanú "Bjorkmanovu medzeru" - hypervariabilnú oblasť zodpovednú za sorpciu a prezentáciu molekúl antigénu. "Bjorkmanova medzera" MHC triedy I obsahuje nanopeptid, ktorý je v tejto forme ľahko detekovateľný špecifickými protilátkami.

Pokračuje proces tvorby komplexu MHC triedy I-antigén intracelulárne nepretržite.

Jeho zloženie zahŕňa akýkoľvekendogénne syntetizované peptidy, vrátane vírusov. Komplex je spočiatku zostavený v endoplazmatickom retikule, kde sa pomocou špeciálneho proteínu proteazóm, transport peptidov z cytoplazmy. Peptid obsiahnutý v komplexe dodáva štruktúrnu stabilitu MHC triedy I. V jeho neprítomnosti funkciu stabilizátora vykonáva sprievodca(kalnexín).

MHC I. trieda sa vyznačuje vysokou rýchlosťou biosyntézy – proces je ukončený za 6 hodín.

Tento komplex vyjadrený takmer na povrchu všetky bunky, okrem erytrocytov nejadrové bunky chýbajútvuet biosyntéza) a vilózne trofoblastové bunky („prevencia“ odvrhnutia plodu). Hustota MHC I. triedy dosahuje 7 000 molekúl na bunku a pokrývajú asi 1 % jej povrchu. Expresia molekúl je výrazne zvýšená pod vplyvom cytokínov, ako je y-interferón.

V súčasnosti sa u ľudí rozlišuje viac ako 200 rôznych variantov triedy HLAI. Sú kódované génmi mapovanými na tri hlavné sublokusy 6. chromozómu a sú zdedené a exprimované nezávisle: HLA-A, HLA-B a HLA-C. Locus A spája viac ako 60 variantov, B - 130 a C - asi 40.

Typizácia jedinca na HLA I. triedu sa uskutočňuje na lymfocytoch sérologickými metódami – v reakcii mikrolymfocytolýzy so špecifickými sérami. Na diagnostiku sa používajú polyklonálne špecifické protilátky, ktoré sa nachádzajú v krvnom sére multipar, pacientok, ktoré dostali masívnu transfúznu liečbu krvi, ako aj monoklonálnych.

Vzhľadom na nezávislú dedičnosť sublokusových génov sa v populácii tvorí nekonečné množstvo neopakujúcich sa kombinácií triedy HLAI. Preto je každý človek striktne jedinečný, pokiaľ ide o súbor histokompatibilných antigénov, s výnimkou identických dvojčiat, ktoré sú si z hľadiska súboru génov absolútne podobné.

Základní biológoviaakademickú úlohu HLAjatrieda je, že definujú biologický jedinecness ("biologický pas") a sú markery „vlastných“ pre imunokompetentné bunky. Infekcia bunky vírusom alebo mutáciou mení štruktúruHLAItrieda. Obsahujúcecudzie alebo modifikované peptidy molekula MHCjatrieda má atypickéštruktúre tohto organizmu a je signálom pre aktiváciu T-killerov (CO8 + -lim-focyty). Bunky, ktoré sa líšia vjatriedazničené ako cudzie.

MHC 1 -na uľahčenie rozpoznania intracelulárnej infekcie.

V štruktúre a funkcii WHCII trieda má niekoľko zásadných rozdielov.

Po prvé, majú zložitejšiu štruktúru. Komplex tvoria dva nekovalentne spojené polypeptidové reťazce (alfa reťazec a beta reťazec), ktoré majú podobnú doménovú štruktúru. Alfa reťazec má jednu globulárnu oblasť a beta reťazec má dve. Oba reťazce ako transmembránové peptidy pozostávajú z troch sekcií – extracelulárnej, transmembránovej a cytoplazmatickej.

Po druhé, „Bjorkmanova medzera“ v MHC triedy II je tvorená súčasne oboma reťazcami. Obsahuje väčší oligopeptid (12-25 aminokyselinových zvyškov) a ten je úplne "schovaný" vo vnútri tejto medzery a v tomto stave nie je detekovaný špecifickými protilátkami.

Po tretie, MHC trieda II zahŕňa peptid zachytený z extracelulárneho prostrediaendocytózou, nie sú syntetizované samotnou bunkou.

po štvrté, WPCIIexpresná triedana povrchu obmedzeného počtubunky: dendritické, B-lymfocyty, T-pomocníci, aktivované makrofágy, žírne, epitelové a endotelové bunky. Detekcia MHC triedy II na atypických bunkách sa v súčasnosti považuje za imunopatológiu.

Biosyntéza MHC triedy II prebieha v endoplazmatickom retikule, výsledný dimérny komplex je potom začlenený do cytoplazmatickej membrány. Pred začlenením peptidu je komplex stabilizovaný chaperónom (kalnexínom). MHC triedy II sa exprimuje na bunkovej membráne do hodiny po antigénovej endocytóze. Expresia komplexu môže byť zvýšená y-interferónom a znížená prostaglandínom napr

Podľa dostupných údajov sa ľudské telo vyznačuje extrémne vysokým polymorfizmom HLA II. triedy, ktorý je do značnej miery určený štrukturálnymi znakmi beta reťazca. Komplex zahŕňa produkty troch hlavných lokusov: HLA DR, DQ a DP. Súčasne lokus DR kombinuje asi 300 alelických foriem, DQ - asi 400 a DP - asi 500.

Prítomnosť a typ histokompatibilných antigénov triedy II sa stanovuje v sérologických (mikrolymfocytotoxických testoch) a reakciách bunkovej imunity (zmiešaná kultúra lymfocytov alebo MCL). Sérologická typizácia MHC triedy II sa vykonáva na B-lymfocytoch pomocou špecifických protilátok nachádzajúcich sa v krvnom sére multipar, pacientok, ktoré dostali masívnu transfúznu liečbu krvi, a tiež syntetizovaných genetickým inžinierstvom. Testovanie v SCL odhaľuje menšie zložky MHC triedy II, ktoré nie sú sérologicky detekovateľné. V poslednej dobe sa stále viac používa PCR.

Biologická úloha MHCII trieda je mimoriadne veľká. V skutočnosti je tento komplex zapojený do ním získaná indukciabahnitá odpoveď. Fragmenty molekuly antigénu sú exprimované na cytoplazmatickej membráne špeciálnej skupiny buniek, ktorá je tzv antigén prezentujúce bunky (APC). Toto je ešte užší kruh medzi bunkami schopnými syntetizovať MHC triedy II. Najaktívnejším APC je dendritická bunka, po ktorej nasledujú B-lymfocyty a makrofágy.