Гриби- це одноклітинні або багатоклітинні еукаріоти без хлорофілу, але близькі до рослин. Патогенні для людини гриби мають такі морфологічні форми:

1 – гіфи (нитки), які при сплетенні утворюють міцелій (тіло гриба).
Розрізняють:

а) істинний (у плісняв) - трубка, розділена або нерозділена перегородками (септами),
покрита загальною оболонкою;

б) хибний (псевдоміцелій у грибів роду Кандіда - Candida) витягнуті, ниткоподібні клітини, кожна з яких має свою оболонку.

2 - круглі та овальні ниркові клітини (у дріжджів та грибів роду Кандіда). Розміри вегетативних форм – xl – х100 мкм. Структура їхня складна: багатошарова клітинна стінка, цитомембрана, диференційоване ядро, полісоми, мітохондрії, включення, пігменти.

3 - суперечки (за призначенням та властивостями вони відрізняються від суперечок бактерій: у грибів це форма розмноження та поширення; суперечки гриба менш стійкі до високої температури).

Розрізняють:

а) ендоспори, вкриті оболонкою. Наприклад, аски у дріжджів, що утворюються в результаті статевого розмноження;

б) екзоспори; контактують із повітрям. Наприклад, мікроконідії у гриба (Penicillium).
Способи розмноження грибів:

1 - поперечний поділ;

2 – фрагментація;

3 - брунькування;

4 – спороутворення;

5 – статевий спосіб.

За типом дихання гриби - аероби та факультативні анаероби, за типом харчування - гетеротрофи. Для вирощування грибів застосовують середовище Сабуро (дріжджовий екстракт + глюкоза + пептон + агар-агар) рН = 6,8

Терміни зростання – від 2-3 днів до місяця. Характер колоній різний: білувато-жовті, що нагадують краплі сметани, пухнасті, зморшкуваті, гіпсовидно-борошністі, шкірясті, з різними борозенками, пігментами. По відношенню до живильного середовища розрізняють 3 види міцелію: повітряний (репродукує), на кінцях якого розташовуються суперечки, і субстратний, що вростає в живильне середовище і міцелій поширення.

Серед патогенних грибів відомі диморфні гриби. Це гриби різної морфології залежно від локалізації: в людини це зазвичай дріжджова форма, але в середовищі Сабуро - мицелиальная. До них відносяться збудники особливо небезпечних мікозів: гістоплазмозу, кокцидіоїдного мікозу та інших захворювань.

Токсиноутворення: більшість грибів утворюють ендотоксин, деякі – екзотоксин. Гриби за будовою міцелію поділяють на дві групи.

1. Нижчі гриби (міцелій несептований). Для медицини та фармації важливі 2 класи:

Зигоміцети (викликають хвороби лікарських рослин);

Ооміцети (наприклад, мукорова пліснява – викликає мукоз у людей та тварин).

2. Вищі гриби (міцелій септований). Наприклад, гриби роду (Penicillium).
За характером розмноження гриби поділяють на дві групи:

Досконалі гриби (характерний статевий спосіб розмноження);

а) - аскоміцети

б) - зигоміцети

Недосконалі гриби - дейтероміцеги (статевий спосіб невиявлений):
а) гриби роду Кандида, що викликають захворювання у людини

Значення грибів:

1. Патогенні гриби викликають у людини мікози.

2. Гриби широко використовуються в промисловій мікробіології як продуценти антибіотиків (Penicillium), білків, полісахаридів, вітамінів, ферментів; у харчовій промисловості (хлібопечення, сироваріння, виготовлення кисломолочних продуктів)

3. Гриби використовують у біотехнології та генній інженерії як об'єкти за допомогою яких отримують необхідні речовини, препарати та ін.

Методи вивчення морфології грибів:

1. У незабарвленому стані, в "розчавленій краплі" її лугом.

Луг розчиняє жир і ороговілі клітини, після чого можна розглянути структуру та елементи грибів у уражених тканинах.

2. У забарвленому стані у чистій культурі (фарбують частіше простим способом).

3. У пофарбованих та незабарвлених гістологічних зрізах.

4. У люмінесцентному мікроскопі після обробки флюорохромами, використовуючи вторинну люмінесценцію.

Актиноміцети- це прокаріоти, що належать до бактерій та складають самостійну групу мікроорганізмів. Основні властивості (форма, будова, розмноження, культивування, чутливість до антибіотиків) зближує їх із бактеріями. Але є властивості (міцелій, розмноження за допомогою спор, характер захворювання – актиномікозу), що зближують із грибами. Значення для людини:

1. Багато актиноміцети є продуцентами антибіотиків.

2. Патогенні актиноміцети викликають у людини актиномікоз. Заразитися можна від тварин і при жуванні травинок, колосків (актиноміцети є мікробами, що вільно живуть) Можливий ендогенний шлях інфікування тканин (збудник живе в ясенних кишенях здорових людей). Найчастіше розвивається актиномікоз шийно-щелепної області, що призводить до утворення запальних ущільнень зі свищами, з яких виділяється рідкий гній із зернятками – друзами (це скупчення актиноміцетів, оточені колбоподібними здуттями клітин паразита). Виявлення друзів - діагностична ознака актиномікозу.

Сиірохети- це прокаріоти, що належать до бактерій. Спірохети мають такі особливості:

1. Форма - звита, як у спірил.

2. Будова: є м'яка клітинна стінка, цитомембрана, нуклеоїд, міофібрили.

3. Розмноження – поперечним розподілом.

4. Мають риси, що зближують їх із найпростішими:

а) пересування відбувається за допомогою міофібрил, що забезпечує їх рух - поступальний, згинальний, обертальний, маятникоподібний

б) фарбування по Романівському-Гімзі;

в) захворювання за характером течії нагадує протозойні (викликані найпростішими);

г) подібні механізми зараження (у тому числі наявність переносників – членистоногих);

д) чутливі до антибіотиків та до препаратів, які застосовуються для лікування протозойних захворювань.

Спірохети Гр-. За типом харчування – гетеротрофи. За типом дихання боррелії та трепонеми – анаероби, а лептоспіри – аероби. Патогенні спірохети відносяться до 3 пологів:

1. Рід Боррелія (мають 3-5 нерівномірних завитків):

а) збудник епідемічного вошивого зворотного тифу (B.recurrentis);

б) збудники кліщових тифів - (B.caucasica). Культивується погано (на культурах тканин, на середовищах із сироваткою та шматочками тканин)

2. Рід Трепонема (мають 8-12 рівномірних завитків, як пружини):

а) збудник сифілісу – (бліда трепонема), T.pallidum. Культивується у яєчку кролика.

3. Рід Лептоспіра (мають безліч дрібних завитків; кінці загнуті та мають потовщення).

Патогенні лептоспіри належать до виду L. interrogans. Культивуються серед Уленгута (водопровідна вода + 30% кролячої сироватки).

Морфологію спірохет зазвичай вивчають у незабарвленому стані, спостерігаючи рухливість в ультрамікроскопі або забарвленому стані (частіше за Романівським-Гімзе).

Найпростіші- це еукаріоти, близькі до тваринних клітин. Розміри від 4 до 200 мкм. Форма - округла, овальна, напівмісячна, грушоподібна і т.д. У деяких найпростіших тіло вкрите відносно тонкою мембраною (амеба), у інших – більш щільною еластичною оболонкою – пеллікулою (балантидії), у джгутикових – перипластом (пелікула + шар поздовжніх фібрил). У цитоплазмі розташовуються 1, іноді 2 ядра (мікро- і макронуклеуси балантидії), полісоми, мітохондрії, включення, вакуолі та ін У деяких в цитоплазмі лежить скелетна органела - аксостиль. Окремі найпростіші мають спеціальні органели: прикріплення (присоска у лямблій), проникнення (у токсоплазм), травлення (у балантидії).

Рух найпростіших здійснюється за допомогою:

Псевдоподії (амеба);

Жгутиків (лямблії)

Вій (балантидії);

Механізм харчування:

1. Усією поверхнею тіла на кшталт фагоцитозу і піноцитозу (амеба).

2. За допомогою спеціальних органел травлення (балантидії). Найпростіші чутливі до дезінфікуючих розчинів (цисти більш стійкі). Для багатьох найпростіших характерна стадійність розвитку, перехід від одного господаря до іншого, причому в організмі певних господарів проходить статевий цикл розвитку. Розмноження здійснюється:

Простим розподілом (амеба);

Множинним розподілом (шизогонія у плазмодія);

Статевим способом (кон'югація або копуляція).

Класифікація найпростіших:

1. Клас корененіжок (збудник амебіазу ін.).

2. Клас джгутикових (збудники трихомонозу, лямбліозу, лейшманіозу, сонної хвороби та ін.).

3. Клас споровиків (збудники малярії, токсоплазмозу, криптоспоридіозу та ін.).

4. Клас віїнні (збудник балантадіазу та ін.). Морфологію найпростіших вивчають:

У незабарвленому стані (у препараті «роздавлена крапля» зі свіжого матеріалу на столику мікроскопа, що підігрівається).

У пофарбованих препаратах (за Романовським-Гімзе та ін.).

ІНФЕКЦІЯ

Інфекція (інфекційний процес)- це процес взаємодії мікроба і сприйнятливого макроорганізму, що супроводжується фізіологічними і патологічними реакціями, порушенням гомеостазу і функцій організму.

Інфекційна хвороба – крайня (за вираженістю) форма інфекції.

Подібна інформація.

Найпростіші - еукаріотичні одноклітинні мікроорганізми, що становлять підцарство Protozoa царства тварин (Animalia). Найпростіші включають 7 типів, з яких чотири типи (Sarcomastigophora, Apicomplexa, Ciliophora, Microspora) мають представників, які викликають захворювання у людини. Розміри найпростіших коливаються середньому від 5 до 30 мкм.

Зовні найпростіші оточені мембраною (пелікулою) - аналогом цитоплазматичної мембрани клітин тварин. Деякі найпростіші мають опорні фібрили.

Цитоплазма та ядро відповідають за будовою еукаріотичних клітин: цитоплазма складається з ендоплазматичного ретикулуму, мітохондрій, лізосом, численних рибосом та ін; ядро має ядерце та ядерну оболонку.

Пересуваються найпростіші за допомогою джгутиків, вій і шляхом утворення псевдоподій.

Найпростіші можуть харчуватися внаслідок фагоцитозу чи утворення спеціальних структур. Багато найпростіших за несприятливих умов утворюють цисти - стадії, що спокою, стійкі до зміни температури, вологості та ін.

Найпростіші забарвлюються по Романівському-Гімзі (ядро - червоного, цитоплазма - синього кольору).

До підтипу Sarcodina (саркодові) відноситься дизентерійна амеба – збудник амебної дизентерії людини. Морфологічно подібна до неї непатогенна кишкова амеба. Ці найпростіші пересуваються шляхом утворення псевдоподій. Поживні речовини захоплюються та занурюються у цитоплазму клітин. Статевий шлях розмноження у амеб відсутній. За несприятливих умов вони утворюють цисту.

Тип Apicomplexa. У класі Sporozoa (споровики) патогенними представниками є збудники токсоплазмозу, кокцидіозу, саркоцистозу та малярії. Життєвий цикл збудників малярії характеризується чергуванням статевого розмноження (в організмі комарів Anopheles) та безстатевого (у клітинах тканин та еритроцитах людини вони розмножуються шляхом множинного поділу). Токсоплазми мають форму напівмісяців. Токсоплазмоз людина заражається від тварин. Токсоплазми можуть передаватися через плаценту та вражати центральну нервову систему та очі плода.

Тип Ciliophora. Патогенний представник - збудник балансидіазу - вражає товстий кишечник людини. Балантидії мають численні вії і тому рухливі.

Тема: Морфологія найпростіших.

Ціль: Вивчення морфології найпростіших патогенних в препаратах з патологічного матеріалу.

Модуль 1.

Тема 6: Морфологія та структура бактерій, спірохет, актиноміцет, грибів та найпростіших.

Актуальність теми.Найпростіші (Protozoa) – це еукаріотичні одноклітинні організми, що мають мікроскопічні розміри. Найпростіші патогенні для людини належать до різних класів: саркодові (дизентерійна амеба), джгутикові (лейшманії, лямблії, трихомонади, трипаносоми), споровики (токсоплазма, малярійні плазмодії), війчасті (балантидії).

Найпростіші поширені у природі. Це пов'язано зі здатністю найпростіших до швидкого розмноження, їх маленькими розмірами, а також тим, що в несприятливих умовах більшість з них утворює цисти, які здатні переносити зміни температури, вологості та ін. Для найпростіших характерний складний життєвий цикл, іноді зі зміною господаря, як наприклад, у збудника малярії (комар-людина) або токсоплазмозу (кішка-людина).

Найпростіші мають органи руху (джгутики, вії, псевдоподії), харчування (вакуолі), а також у них можливе харчування шляхом фагоцитозу. Розмножуються вони декількома шляхами: простим і множинним поділом, статевим шляхом, утворенням цист. Поверхня тіла найпростіших покрита клітинною мембраною. Більшість із них є зовнішня еластична оболонка – пелікула, виконує захисну функцію. Для проникнення в клітину господаря у найпростіших є спеціальні пристосування, наприклад, у токсоплазм – складний комплекс органел – коноїд з фібрилами, трихомонади та лямблії мають спеціальні присоски.

Для виявлення найпростіших використовується мікроскопія нативних та пофарбованих препаратів із досліджуваного матеріалу із застосуванням імерсійного, фазово-контрастного чи люмінесцентного мікроскопів. Для вивчення ультраструктури використається електронна мікроскопія.

Конкретні цілі:

Ознайомитись із класифікацією патогенних найпростіших.
Розібрати та вивчити схеми життєвих циклів найпростіших патогенних.
Навчитися трактувати морфологічні ознаки кожного виду.
Зробити висновки про морфологічні форми найпростіших.
Навчитися трактувати та аналізувати результати мікроскопічного дослідження найпростіших патогенних.

Вміти:

Проводити мікроскопію препаратів найпростіших патогенів, пофарбованих по Романовському-Гімзі.
Аналізувати морфологічні ознаки найпростіших патогенних.

Теоретичні питання:

Класифікація найпростіших.
Структура клітин найпростіших (еукаріотів).
Порівняльна характеристика клітинної будови прокаріотів та еукаріотів.
Методи фарбування найпростіших.
Можливість дослідження нативних препаратів для діагностики протозойних інфекцій.
Пріоритет вітчизняних учених до вивчення деяких протозойних інфекцій. Роботи В.А. Льоша, Є.І. Марціновського, П.Ф. Боровського.

Мікроскопія демонстраційних препаратів найпростіших патогенів, пофарбованих по Романовському-Гімзі.
Замальовування демонстраційних препаратів та схем життєвих циклів найпростіших патогенних у протокол.
Оформлення протоколу.

Література:

1. Коротяєв А.І., Бабічов С.А. Медична мікробіологія, імунологія та вірусологія / Підручник для медичних ВНЗ, Санкт-Петербург «Спеціальна література», 1998.-592 с.

2.Тімаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Мікробіологія/Підручник. - 2-ге вид., перероб. та дод. - М.: Медицина, 1983, - 512с.

3. Пяткін К.Д., Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія з вірусологією та імунологією. - Київ: Вища школа, 1992. - 431с.

4.Медична мікробіологія / За редакцією В.І. Покровського. - М.: ГЕОТАР-МЕД, 2001.-768с.

5. Циганенко О.Я., Павленко Н.В. Мікробіологія, вірусологія та імунологія /Керівництво до практичних зайняття для студентів медичних та фармацевтичних ВУЗів, Харків, ХДМУ, 1996. – 272с.

5. Конспект лекції.

Додаткова література:

1. Казанцев А.П. Токсоплазмоз. - М: Медицина, 1985. - 168 с.

2. Епідеміологія. / За ред. Синяк К.М. - К.: Здоров' я, 1993. - 460с.

3. Імунологія інфекційного процесу. / За ред. Покровського В.І., Гордієнко С.П., Литвинова В.І. - М: Медицина, 1993. - 305 с.

4. Лобан К.М., Полозок Є.С. Малярія. - М.: Медицина, 1983. - 224с.

Самостійна робота складається з вивчення класифікації найпростіших, аналізу схем життєвих циклів найпростіших, патогенних для людини. Потім студенти вивчають демонстраційні препарати та замальовують їх у протокол заняття.

п/п	Етапи	Час у хв	Способи навчання	Оснащення	Місце проведення
				Таблиці, атлас	Навчальна кімната
	Самостійна робота		Граф логічної структури	Іммерсійний мікроскоп, препарати найпростіших патогенних, пофарбованіе по Романівському-Гімзі
			Цільові навчальні завдання
	Тестовий контроль		Тести
	Аналіз результатів роботи

Цільові навчальні завдання до теми «МОРФОЛОГІЯ НАЙпростіших»:

1. У вагітної в мазках при мікроскопії були виявлені токсоплазми. Які з наведених нижче морфологічних ознак має цей збудник у мазках, забарвлених по Романівському-Гімзі?

2. У хворого зі скаргами на частий рідкий стілець і болями в животі в баклабораторії була виділена Entamoeba histolytica

B. Подовжені клітини з 1 джгутиком, 1 ядром та ундулюючою мембраною.

D. Великі клітини з 1 ядром, псевдоподіями та поглиненими еритроцитами.

3. У клініку надійшов хворий, якому було поставлено попередній діагноз: малярія, викликана P.ovale. Які з наведених нижче морфологічних ознак має цей збудник у стадії кільця в мазках, пофарбованих по Романівському-Гімзі?

A. У збільшених еритроцитах – кільцеподібні трофозоїти та зерна Шюфф-нера

B. У збільшених овальних еритроцитах-вакуолі, облямовані блакитною цитоплазмою з рубіновими великими ядрами і великі зерна Джеймса.

E. Клітини у формі півмісяця з 1 рубіновим ядром та блакитною цитоплазмою.

4. До лікаря звернувся чоловік 35 років з мокнучою виразкою на правій нозі. Відомо, що пацієнт 2 тижні тому повернувся із Африки. При мікроскопічному дослідженні мазків з відокремлюваної виразки, пофарбованих по Романівському-Гімзі, виявили внутрішньоклітинно розташовані дрібні клітини овальної форми без джгутиків із сірувато-блакитною цитоплазмою та червоно-фіолетовим ядром. Для якого з наведених нижче найпростіших характерна така морфологічна форма?

А. Plasmodium malariae

У . Leishmania tropica

З. Toxoplasma gondii

D. Trichomonas vaginalis

E. Giardia lamblia

5. При мікроскопічному дослідженні свіжих випорожнень хворого зі скаргами на рідке випорожнення, здуття живота, втрату апетиту були виявлені клітини грушоподібної форми з симетрично розташованими 2 ядрами, 2 базальними тільцями, 2 парабазальними тільцями, 2 нитками аксостилю. Для якого з наведених нижче найпростіших характерна така морфологічна форма?

А. Plasmodium malariae

У . Leishmania tropica

З. Toxoplasma gondii

D. Trichomonas vaginalis

E. Giardia lamblia

6. До лікаря-інфекціоніста звернувся пацієнт зі скаргами на сонливість, стомлюваність, виснаження, пропасницю. Відомо, що він нещодавно був у відрядженні в Африці. При мікроскопії мазків крові, пофарбованих по Романівському-Гімзі, виявлені клітини подовженої форми з 1 центральним ядром, 1 джгутиком, що відходить від задньої частини клітини, і різко вираженою ундулюючою мембраною. Для якого з наведених нижче найпростіших характерна така морфологічна форма?

А. Trypanosoma brucei

У . Leishmania tropica

З. Toxoplasma gondii

D. Trichomonas vaginalis

E. Giardia lamblia

7. У хворого зі скаргами на рідке випорожнення, здуття живота, втрату апетиту в баклабораторії була виділена Giardia lamblia . Яка з наведених нижче морфологічних форм характерна для цього збудника в мазках зі свіжих випорожнень?

A. Округлі клітини з 1 ядром та кінетопластом.

B. Подовжені клітини з 1 джгутиком, 1 ядром та ундулюючою мембраною.

C. Клітини грушоподібної форми з 2 ядрами та 4 парами джгутиків.

E. Клітини у формі півмісяця із 1 ядром.

8. У хворої з клінікою вагініту в баклабораторії при мікроскопії було виявлено трихомонади. Які з наведених нижче морфологічних ознак має цей збудник у мазках, пофарбованих по Романівському-Гімзі?

A. Округлі клітини з рубіновим ядром, блакитною цитоплазмою, червоними 5 джгутиками та аксостилем, та ундулюючою мембраною.

B. Подовжені клітини з 1 джгутиком, 1 ядром та ундулюючою мембраною.

C. Клітини грушоподібної форми з 2 ядрами та 4 парами джгутиків.

D. Великі клітини з 1 ядром, псевдоподіями та проковтнутими еритроцитами.

E. Клітини у формі півмісяця із 1 ядром.

9. У клініку надійшов хворий, якому було поставлено попередній діагноз: малярія, викликана P.vivax. Які з наведених нижче морфологічних ознак має цей збудник у стадії кільця в мазках, пофарбованих по Романівському-Гімзі?

A. У збільшених еритроцитах – великі центральні вакуолі, облямовані блакитною цитоплазмою з рубіново-червоними ядрами, і зерна Шюффнера.

B. У збільшених овальних еритроцитах – кільцеподібні великоядерні тро-фозоїти та великі зерна Джеймса.

C. В еритроцитах по 2-3 дрібних трофозоїту та поодинокі великі рожево-фіолетові плями Мауера.

D. У стрічкоподібних еритроцитах по 1 кільцеподібному трофозоїту.

E. Клітини у формі півмісяця з 1 рубіновим ядром та блакитною цитоплазмою.

10. У хворого зі скаргами на сонливість, стомлюваність, виснаження, лихоманку, який нещодавно був у відрядженні в Африці, у баклабораторії було виділено Trypanosoma brucei . Яка з наведених нижче морфологічних форм характерна для цього збудника в мазках крові, пофарбованих по Романівському-Гімзі?

A. Округлі клітини з 1 ядром та кінетопластом.

B. Подовжені клітини з 1 джгутиком, 1 ядром та ундулюючою мембраною.

C. Клітини грушоподібної форми з 2 ядрами та 8 джгутиками.

D. Великі клітини з 1 ядром, псевдоподіями та проковтнутими еритроцитами.

E. Клітини у формі півмісяця із 1 ядром.

Ознайомлення із класифікацією найпростіших.
Вивчення морфології найпростіших за схемами, таблицями та демонстраційними препаратами.
Розбір схеми життєвого циклу малярійних плазмодіїв.
Розбір схеми життєвого циклу трипаносом, лейшманій, лямблій, тріхомонад, токсоплазм.
Мікроскопія та аналіз демонстраційних препаратів найпростіших.
Замальовування демонстраційних препаратів та схем життєвих циклів найпростіших.
Оформлення протоколу.

Граф логічний структури теми: «МОРФОЛОГІЯ НАЙпростіших»

Тип

Методичні вказівки для студентів до практичного заняття №7

Тема:

Ціль: Вивчити морфологію та методи виявлення рикетсій, хламідій та мікоплазм.

Модуль 1: Морфологія та фізіологія мікроорганізмів.

Тема 7: Морфологія рикетсій, хламідій та мікоплазм.

Актуальність теми.На території країн СНД спостерігаються наступні рикетсіози: висипний тиф (у тому числі хвороба Бріля), щурий тиф, марсельська лихоманка, кліщовий тиф висипний Північної Азії, везикулезний рикетсіоз, Ку-лихоманка, лихоманка цуцугаму. Є активно діючі природні осередки везикулезного рикетсіозу, марсельської лихоманки, лихоманки цуцугамуші та кліщового висипного тифу Північної Азії.

Епідемічний висипний тиф – це гостропротекаюча системна інфекція з тяжкою інтоксикацією, яка при швидкому епідемічному поширенні дає до 30% смертей.

Лабораторна діагностика багатьох рикетсіозів ґрунтується на виділенні збудника з крові хворих. У зв'язку з цим необхідно знати морфологію рикетсій та методи їх забарвлення для розпізнання їх під мікроскопом.

Назву цій групі мікроорганізмів дав у 1916р. Роха-Ліма, який запропонував назвати збудника висипного тифу Rickettsia prowazekii на честь двох вчених: американського – Г.Т. Ріккетса і чеського - С. Прова-чека, які першими його виявили (Г.Т. Ріккетс в 1909 р., С. Провачек в 1913 р.) щодо сипного тифу і, заразившись загинули від нього.

Сімейство Ricrttsiaceae складається з трьох триб: Rickettsiaceae, Ehrlichiae, Wolbachieae. Тріба Rickettsiaceae ділиться на 4 роди: Rickettsia, Rochalimaea, Coxiella, Ehrlichia.

Хламідії – унікальна група дрібних патогенних грамнегативних нерухомих бактерій, які є збудниками різних хвороб, людини та тварин. У людей вони викликають захворювання очей, сечостатевої та дихальної систем. Щорічно на трахому хворіють від 400 до 500 млн. осіб, з них понад 10 млн. стають сліпими. На уретрити хламідійної етіології страждають до 6% чоловіків; 10-12% жінок дітородного віку, у 50% яких при пологах відбувається інфікування дитини та розвивається офтальмія та пневмонія новонароджених.

Хламідії – облігатні внутрішньоклітинні організми прокаріотної системи. Мають сферичну форму, РНК і ДНК, рибосоми, клітинні стінки за будовою подібні до стінок грамнегативних бактерій, але позбавлені пептидогліканів; добре фарбуються по Романівському-Гімзі.

Хламідії розмножуються бінарним розподілом тільки в цитоплазмі еукаріотних клітин за унікальним циклом розвитку.

Життєвий цикл хламідій представлений двома основними формами, що змінюють один одного – ретикулярні тільця (вегетативна форма) та елементарні тільця (спороподібні форми).

Елементарні тільця (ЕТ) – інфекційна позаклітинна форма. Вони забезпечують передачу захворювання від людини (тварини) до людини. Ретикулярне тільце (РТ) – внутрішньоклітинна форма, що розвивається з ЕТ, що потрапив у цитоплазму. Після утворення РТ хламідійна клітина бінарно ділиться, утворюються тільця включення у вигляді вакуолей у цитоплазмі. Тільця включення прилягають до ядра клітини та їх можна виявити в імерсійному мікроскопі при фарбуванні, що використовується для діагностики хламідіозів.

Для людини патогенні такі представники роду Chlamydia : C . trachomatis, C. psittaci, C. pneumoniae.

Класифікація хламідій:

Сімейство Chlamydiaceae

рід Chlamydia рід Chlamydophila

C.trachomatis C.pneumoniae

C.suis C.pecorum

C.muridarum C.psittaci

C.abortus

C.caviae

C. felis

Бактеріологічна діагностика хламідіозів складається з попереднього мікроскопічного дослідження матеріалу з метою виявлення хламідій в інфікованих клітинах, забарвлених по Романівському-Гімзі.

Багато видів мікоплазм патогенні для людини, і викликають ураження дихальних шляхів, суглобів, серця, сечостатевої та нервової систем.

30-60% уретритів негонококкової етіології спричинені M. hominis . Існує думка, що уреаплазмова інфекція може бути причиною як жіночої, так і чоловічої безплідності. Крім того, M. hominis при внутрішньоутробному зараженні плода може бути причиною вроджених аномалій розвитку дитини у зв'язку з її здатністю впливати на хромосоми клітини.

Лабораторна діагностика не відіграє вирішальної ролі у розпізнаванні мікоплазмової пневмонії. Широко використовується виділення чистої культури збудника з наступною ідентифікацією на підставі морфологічних, культуральних та ін ознак.

Мікоплазми - вільноживучі прокаріоти, що не мають істинної клітинної стінки і не здатні синтезувати її компоненти. Функції клітинної стінки виконує тришарова цитоплазматична мембрана. Більшість видів представлені дрібними клітинами, що характеризуються вираженим плеоморфізмом, можуть утворювати кокоподібні, розгалужені і великі багатоядерні форми здатні утворювати псевдоміцелій. Фарбуються по Романівському-Гімзі.

Від людини виділяють представників роду Mycoplasma , Ureaplasma включають патогенні та сапрофітні види.

Класифікація мікоплазм:

Сімейство Mycoplasmaceae

рід Mycoplasma рід Ureaplasma

M.buccale Ureaplasma urealyticum

M.fermentans

M.hominis

M.pneumoniae

M.genitalium

M.orale

M.salivarum

Для людини патогенні M. pneumoniae, M. hominis, Ureaplasma urealyticum.

Конкретні цілі:

Вміти:

Описувати пофарбовані мікропрепарати, виготовлені з міко-плазм.
Мікроскопувати, описувати і трактувати забарвлені мікропрепарати, приготовані з матеріалу, де містяться рикетсії, цитоплазматичні включення хламідій.
Аналізувати результати мікроскопічного дослідження матеріалу, де містяться рикетсії, хламідії, мікоплазми.

Теоретичні питання:

Таксономія рикетсій.
Морфологія рикетсій, їх класифікація формою.
Методи фарбування рикетсій
Представники рикетсії, патогенні для людини.
Таксономія хламідій, їхня класифікація, патогенні представники.
Біологічна особливість хламідій. Основні стадії життєвого циклу хламідій.
Морфологія хламідій, ретикулярні тільця, елементарні тільця.
Методи виявлення цитоплазматичних включень хламідій. Практичне використання тілець-включень.
Таксономія мікоплазм. Класифікація, патогенні представники.
Ультраструктура та морфологія мікоплазм.
Методи фарбування мікоплазм.
Представники мікоплазми патогенні для людини.

Практична робота, що виконується на занятті:

Мікроскопіювати демонстраційний препарат, приготований із чистої культури мікоплазм і забарвлений по Романівському-Гімзі.
Мікроскопувати пофарбовані по Здродівському та Романівському-Гімзі мазки з матеріалу, що містить рикетсії.
Мікроскопувати мазок, приготовлений із зіскрібка уретри та пофарбований за Романовським-Гімзом, з метою виявлення включень у цитоплазмі клітин епітелію уретри.
Замалювати демонстраційні препарати до протоколу.
Замалювати в протокол життєвого циклу хламідій.
Оформити протокол.

Література:

Коротяєв А.І., Бабічов С.А. Медична мікробіологія, імунологія та вірусологія. - Санкт-Петербург «Спеціальна література», 1998.-579с.
Воробйов А.В., Биков А.С., Пашков Є.П., Рибаков А.М. Мікро-біологія. - М.: Медицина, 1998. - 336с.
Медична мікробіологія / За редакцією В.І. Покровського. - М.: ГЕОТАФ-МЕД, 2001. - 768с.
Конспект лекції.

Короткі методичні вказівки до роботи на практичних заняттях.

На початку заняття проводиться перевірка рівня підготовки студентів на цю тему.

Самостійна робота складається з вивчення морфології та ультраструктури рикетсій, хламідій та мікоплазм за кольоровими таблицями.

Студенти переглядають забарвлені демонстраційні препарати в імерсійному мікроскопі, замальовують їх у протокол, вказуючи латинську назву мікроорганізму та метод забарвлення.

Наприкінці заняття проводиться тестовий контроль та аналіз самостійної роботи кожного студента.

Технологічна карта проведення практичного заняття:

пп	Етапи	Час за хв.	Засоби навчання	Устаткування	Місце проведе ня
	Перевірка та корекція вихідного рівня підготовки до заняття		Тестові завдання вихідного рівня	Таблиці, атлас, малюнки	НАВЧАЛЬНА КІМНАТА
	Самостійна робота		Графи логічної структури	Іммерсійний мікроскоп; мікропрепарати з культури мікоплазм, забарвлених по Романівському-Гімзі; мікропрепарат із матеріалу, що містить рикетсії, пофарбований за Здродівським; оксифільні включення елементарних тілець C. trachomatis у цитоплазмі епітеліоцитів уретри. Забарвлення по Романівському-Гімзі.
	Самоперевірка та корекція засвоєного матеріалу		Цільові навчальні завдання
	Тестовий контроль		Тести
	Аналіз результатів роботи

Цільові навчальні завдання до теми: «МОРФОЛОГІЯ РІККЕТСІЙ, ХЛАМІДІЙ І МІКОПЛАЗМ»

З плевральної рідини хворого на атипову пневмонію виділено збудник, який відрізняється поліморфізмом, забарвлюється по Романовському-Гімзі. Який із перелічених мікроорганізмів, найімовірніше, викликав атипову пневмонію.

А . Mycoplasma pneumoniae B. Mycoplasma artrrhitidis

C. Mycoplasma orale D. C.trachomatis

E. Rickettsia prowazekii

2. До шкірно-венерологічного диспансера надійшов хворий з діагнозом «негонококовий уретрит». Який із перелічених мікроорганізмів є збудником даного захворювання.

А . Ureaplasma urealyticum B. Mycoplasma pneumoniae

C. Mycoplasma artrrhitidis D. Mycoplasma orale

E. Mycoplasma fermentans

3. У мазку-зіскобі з уретри хворого при фарбуванні по Романівському-Гімзі виявлено включення у вигляді шапочки поблизу ядра. Який із перерахованих збудників може викликати подібні утворення у клітинах призматичного епітелію уретри.

C. Chlamydia psittaci D. Ureaplasma urealyticum

E. Trihomonas vaginalis

4. Через 5 днів після купання в басейні у купальника виявили захворювання очей, що виражається потовщенням кон'юнктиви і яскраво-червоним забарвленням нижнього склепіння. У мазку, приготованому з відокремлюваного кон'юктиви ока, виявили включення в уражених клітинах. Який збудник викликав у купальника кон'юнктивіт із включеннями.

A. Chlamydia trachomatis B. Chlamydia pneumoniae

C. Стафілокок D . Гонококк Е. Аденовіруси

5. У працівників зоопарку, які доглядають папуги, виникла атипова пневмонія. Який збудник став причиною цього захворювання.

A. Chlamydia psittaci B. Mycoplasma pneumoniae

C. Chlamydia trachomatis D. Ureaplasma urealyticum

E. Mycoplasma hominis

6. У водія далеких рейсів лікар запідозрив висипний тиф та взяв кров для лабораторної діагностики висипного тифу. Як називається збудник висипного тифу.

A. Treponema pallidum B. Borrelia recurrentis

C. Mycoplasma pneumoniae D. Rickettsia prowazekii

E. Coxiella burnetti

В. Спірохети

С. Мікоплазми

D. Вібріони

Е. Спірилли

Алгоритм лабораторної роботи:

Вивчити за таблицею морфологію та ультраструктуру рикетсій.
Вивчити техніку забарвлення рикетсій по Здродовському.
Мікроскопувати готові препарати з матеріалу, що містить рикетсії та забарвленого по Здродовському.
Вивчити за таблицею та замалювати цикл розвитку хламідій.
Мікроскопувати пофарбований по Романівському-Гімзі мазок-сос-коб із уретри хворого з включеннями C. trachomatis.
Вивчити за таблицею структуру мікоплазм.
Мікроскопувати готовий мазок з культури мікоплазм, забарвлений по Романівському-Гімзі.
Проаналізувати демонстраційні препарати.
Замалювати демонстраційні мікропрепарати до протоколу. Оформити протокол.

Графологічна структура теми "МОРФОЛОГІЯ РИКЕТСІЙ, ХЛАМІДІЙ ТА МІКОПЛАЗМ"

Методичні вказівки для студентів до практичного заняття № 8

Тема: Морфологія вірусів людини та бактеріофагів.

Ціль: Вивчення морфології вірусів людини та бактеріофагів.

Модуль 1. Морфологія та фізіологія мікроорганізмів.

Змістовий модуль 2.Морфологія та структура прокаріотів, паразитичних одноклітинних еукаріотів та вірусів.

Тема 8: Морфологія та структура бактерій, спірохет, актиноміцетів, грибів, найпростіших та вірусів.

За допомогою електронного мікроскопа встановлено, що прості віріони складаються з нуклеїнової кислоти, що щільно упакована в білкову оболонку - капсид, що має строго впорядковану структуру. За морфологічною структурою нуклеїнова кислота та капсид є нуклеокапсидом, а за хімічними властивостями – це нуклеопротеїди. У деяких вірусів (аденовіруси, пікорнавіруси, паповавіруси) нуклеокапсид складається з капсомерів, що являють собою скупчення поліпептидів. Багато складно організованих віріонів мають ще й зовнішню оболонку (суперкапсид), в якій містяться ліпіди та вуглеводи клітини господаря. Суперкапсид – оболонка, що оточує нуклеокапсид, є у багатьох вірусів (міксовіруси, герпесвіруси та ін.).Залежно від порядку розташування капсомерів розрізняють віруси із трьома типами симетрії: спіральним, кубічним, змішаним.

Морфологію та структуру вірусів вивчають за допомогою електронного мікроскопа. Крім повноцінних віріонів зустрічаються дефектні віруси та псевдовіріони. Дефектний вірус – це вірус, який функціонально неповноцінний деяких етапах репродукції. Псевдовіріони - це віруси, в капсид, яких міститься нуклеїнова кислота клітини господаря, а не вірусна нуклеїнова кислота.

Бактеріофаги - Це віруси мікробних клітин, які викликають їх лізис. Ліза бактеріальних клітин вперше виявив у 1898 р. російський мікробіолог Н.Ф.Гамалея. Віруси, що вражають мікроорганізми, назвали фагами. Фаги розрізняються за морфологією, типом нуклеїнової кислоти, за хімічною структурою та характером взаємодії з мікробною клітиною. Наприклад, фаги кишкової палички складаються з головки, комірця, хвостового відростка, базальної платівки з короткими шипами та хвостовими нитками. Головка фага, діаметр якої коливається не більше 60-90 нм, має шестикутну форму. Усередині головки міститься нуклеїнова кислота, оточена білковою оболонкою. Хвостовий відросток фага складається з порожнистого циліндричного стрижня, оточеного скоротливим чохолом. Хвостовий відросток досягає 250 нм завдовжки і 30 нм завширшки. Базальна платівка має шестикутну форму. Від неї відходять шість шипів та шість хвостових ниток (фібрил). Хвостовий відросток забезпечує прикріплення фага до мікробної клітини.

Існують фаги та іншої будови: з довгим відростком і чохолом, що не скорочується, з коротким відростком і без відростка. Фаги мають сувору специфічність і вражають лише певні види мікроорганізмів. Розрізняють моновалентні фаги, що лізують мікробні клітини певного виду, та полівалентні фаги, здатні викликати лізис групи споріднених видів мікроорганізмів. З специфічності фаги широко використовуються для ідентифікації мікроорганізмів.

Конкретні цілі:

Ознайомитися з класифікацією вірусів та бактеріофагів.
Розібрати та вивчити схеми репродукції вірусів та бактеріофагів.
Навчитися трактувати морфологічні ознаки кожного сімейства вірусів.
Зробити висновки про морфологічні ознаки вірусів.
Навчитися трактувати та аналізувати результати мікроскопічного дослідження ЦПД вірусів.

Вміти:

Проводити мікроскопію препаратів з цитопатичною дією вірусів за допомогою іммерсійного мікроскопа.
Аналізувати морфологічні ознаки вірусів.

Теоретичні питання:

Біологічні особливості вірусів
Морфологія та ультраструктура вірусів (із зазначенням специфічних термінів).
Електронний мікроскоп. Принцип роботи.
Методи непрямого виявлення наявності вірусів у організмі.
Методи виявлення вірусів у досліджуваному матеріалі із використанням імерсійної люмінесцентної мікроскопії.
Поняття про люмінесцентний мікроскоп.

Практичні завдання, які виконуються на занятті:

Мікроскопія демонстраційних препаратів цитопатичного впливу вірусів.
Замальовування демонстраційних препаратів та схем репродукції вірусів у протокол.
Оформлення протоколу.

Література:

2. Тімаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Мікробіологія/Підручник. - 2-ге вид., перероб. та дод. - М.: Медицина, 1983, - 512с.

3. Пяткін К.Д., Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія з вірусологією та імуноло-гією. – Київ: Вища школа, 1992. – 431с.

4. Медична мікробіологія / За редакцією В.І. Покровського. - М.: ГЕОТАР-МЕД, 2001.-768с.

6. Балаклієць Н.І, Циганенко О.Я., Мінухін В.В. Загальна мікробіологія: Навчальний посібник для студентів мед. та фарм. ВНЗ /За редакцією О.Я. Циганенка. - Х.: Основа, 2002. - 248 с.

7. Конспект лекції.

Додаткова література :

1. Букринская А.Г., Жданов В.М. Молекулярні основи патогенності вірусів. - М.: Медицина, 1991. - 255 с.

2. Посібник з медичної вірусології /Під редакцією Гіріна В.М.- К.: Здоров'я, 1995.- 368 с.

3. Вірусологія в 3-х томах / За редакцією Філдса Б. та ін - М.: Світ, 1989. - 494 с.

Короткі методичні вказівки на роботу на практичному занятті.

На початку заняття проводиться перевірка рівня підготовки студентів до заняття.

Самостійна робота складається з вивчення класифікації вірусів, аналізу схем реплікаціївірусів та бактеріофагів. Потім студенти вивчають демонстраційні препарати та замальовують їх у протокол заняття.

Наприкінці заняття проводиться тестовий контроль та аналіз кінцевих результатів самостійної роботи кожного студента.

Технологічна мапа проведення практичного заняття.

п/п	Етапи	Час у хв	Способи навчання	Оснащення	Місце проведення
	Перевірка та корекція вихідного рівня підготовки до заняття		Тестові завдання вихідного рівня	Таблиці, атлас , навчальний тенд з вірусології	Навчальна кімната
	Самостійна робота		Граф логічної структури	Іммерсійний мікроскоп, демонстраційний ні препарати з ЦПД вірусів
	Самостійна перевірка та корекція освоєння матеріалу		Цільові навчальні завдання
	Тестовий контроль		Тести
	Аналіз результатів роботи

Цільові навчальні завдання до теми «МОРФОЛОГІЯ ВІРУСІВ ЛЮДИНИ ІБАКТЕРІОФАГІВ»:

1. До РНК-вірусів відносяться:

А. Параміксовіруси

В. Парвовіруси

С. Герпесвіруси

D. Аденовіруси

Е. Поксвіруси

2. Яку форму має вірус сказу?

А. Сферичну

В. Палочкоподібну

С. Ниткоподібну

D. Кулеподібну

Е. Ланцетоподібну

3. Які з цих вірусів мають нуклеокапсид зі спіральним типом симетрії?

А. Ентеровіруси, віруси

гепатиту А

В. Віруси сказу, грипу,

паротиту

С. Аденовіруси, реовіруси

D. Віруси гепатиту А,

кліщового енцефаліту

Е. Ентеровіруси, герпесвіруси

4. Який тип симетрії властивий бактеріофагам?

А. Ікосаедричний

В. Бінарний

С. Трапецієподібний

D. Ромбоподібний

Е. Ниткоподібний

5. До оболонкових вірусів відносять:

А. Ретровіруси

В. Реовіруси

С. Аденовіруси

D. Пікорнавіруси

Е. Парвовіруси

6. Структурна одиниця нуклеокапсиду це:

А. Пепломір

В. Капсомер

С. Ізомер

D. М-білок

Є. Ліпід

7. Чим обумовлений спіральний тип симетрії капсиду вірусів?

А. Гвинтоподібною структурою

нуклеокапсиду

В. Освіта ізометрична

порожнього тіла

З. Зміною структури капсиду

D . Утворенням пепломерів

Е. Синтезом білкової оболонки

8. Як називаються віруси, в капсид яких укладено нуклеїнову кислоту клітини-господаря?

А. Псевдовіріони

В. Бактеріофаги

С. Дефектні віруси

D. Поксвіруси

Е. Аденовіруси

Алгоритм лабораторної роботи:

Ознайомлення з класифікацією вірусів та бактеріофагів.
Вивчення молекулярно-генетичної організації та репродукції вірусів та бактеріофагів за схемами, таблицями та атласом.
Мікроскопія та аналіз демонстраційних препаратів із ЦПД вірусів.
Замальовка демонстраційних препаратів та схем репродукції вірусів.
Оформлення протоколу.

Г раф логічної структури теми: "МОРФОЛОГІЯ ВІРУСІВ ЛЮДИНИ І БАКТЕРІОФАГІВ"

Модуль 1.Морфологія та фізіологія мікроорганізмів.

Тема 6:Морфологія та структура бактерій, спірохет, актиноміцет, грибів та найпростіших.

Актуальність теми.Найпростіші (Protozoa) – це еукаріотичні одноклітинні організми, що мають мікроскопічні розміри. Найпростіші патогенні для людини належать до різних класів: саркодові (дизентерійна амеба), джгутикові (лейшманії, лямблії, трихомонади, трипаносоми), споровики (токсоплазма, малярійні плазмодії), війчасті (балантидії).

Конкретні цілі:

1. Ознайомитись із класифікацією патогенних найпростіших.

2. Розібрати та вивчити схеми життєвих циклів патогенних найпростіших.

3. Навчитися трактувати морфологічні ознаки кожного виду.

4. Зробити висновки про морфологічні форми найпростіших.

5. Навчитися трактувати та аналізувати результати мікроскопічного дослідження патогенних найпростіших.

Вміти:

§ Проводити мікроскопію препаратів найпростіших патогенів, пофарбованих по Романовському-Гімзі.

§ Аналізувати морфологічні ознаки патогенних найпростіших.

Теоретичні питання:

1. Класифікація найпростіших.

2. Структура клітин найпростіших (еукаріотів).

3. Порівняльна характеристика клітинної будови прокаріотів та еукаріотів.

4. Методи фарбування найпростіших.

5. Можливість дослідження нативних препаратів для діагностики протозойних інфекцій.

6. Пріоритет вітчизняних учених до вивчення деяких протозойних інфекцій. Роботи В.А. Льоша, Є.І. Марціновського, П.Ф. Боровського.

Практичні завдання, які виконуються на занятті:

1. Мікроскопія демонстраційних препаратів найпростіших патогенних, пофарбованих по Романовському-Гімзі.

2. Замальовка демонстраційних препаратів та схем життєвих циклів найпростіших патогенних у протокол.

3. Оформлення протоколу.

Література:

3. Пяткін К.Д., Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія з вірусологією та імунологією. - Київ: Вища школа, 1992. - 431с.

4.Медична мікробіологія / За редакцією В.І. Покровського. - М.: ГЕОТАР-МЕД, 2001.-768с.

5. Конспект лекції.

Додаткова література:

1. Казанцев А.П. Токсоплазмоз. - М: Медицина, 1985. - 168 с.

2. Епідеміологія. / За ред. Синяк К.М. – К.: Здоров'я, 1993. – 460с.

4. Лобан К.М., Полозок Є.С. Малярія. - М.: Медицина, 1983. - 224с.

Найпростіші- еукаріотичні одноклітинні мікроорганізми, що становлять підцарство Protozoa царства тварин (Animalia). Найпростіші включають 7 типів, з яких чотири типи (Sarcomastigophora, Apicomplexa, Ciliophora, Microspora) мають представників, які викликають захворювання у людини. РозміриНайпростіші коливаються в середньому від 5 до 30 мкм.

Зовні найпростіші оточенімембраною (пелікулою) - аналогом цитоплазматичної мембрани клітин тварин. Деякі найпростіші мають опорні фібрили.

Цитоплазма та ядровідповідають за будовою еукаріотичних клітин: цитоплазма складається з ендоплазматичного ретикулуму, мітохондрій, лізосом, численних рибосом та ін; ядро має ядерце та ядерну оболонку.

Пересуваються найпростішіза допомогою джгутиків, вій і шляхом утворення псевдоподій.

Найпростіші можуть харчуватисявнаслідок фагоцитозу чи утворення особливих структур. Багато найпростіших за несприятливих умов утворюють цисти - стадії, що спокою, стійкі до зміни температури, вологості та ін.

Найпростіші фарбуютьсяпо Романівському - Гімзі (ядро - червоного, цитоплазма - синього кольору).

До підтипу Sarcodina(Саркодові) відноситься дизентерійна амеба - збудник амебної дизентерії людини. Морфологічно подібна до неї непатогенна кишкова амеба. Ці найпростіші пересуваються шляхом утворення псевдоподій. Поживні речовини захоплюються та занурюються у цитоплазму клітин. Статевий шлях розмноження у амеб відсутній. За несприятливих умов вони утворюють цисту.

Тип Apicomplexa. У класі Sporozoa (споровики) патогенними представниками є збудники токсоплазмозу, кокцидіозу, саркоцистозу та малярії. Життєвий цикл збудників малярії характеризується чергуванням статевого розмноження (в організмі комарів Anopheles) та безстатевого (у клітинах тканин та еритроцитах людини вони розмножуються шляхом множинного поділу). Токсоплазми мають форму напівмісяців. Токсоплазмоз людина заражається від тварин. Токсоплазми можуть передаватися через плаценту та вражати центральну нервову систему та очі плода.

Тип Ciliophora. Патогенний представник - збудник балансидіазу - вражає товстий кишечник людини. Балантидії мають численні вії і тому рухливі.

C. Mycoplasma pneumoniae D. Rickettsia prowazekii

Методичні вказівки для студентів до практичного заняття № 8

Змістовий модуль 2.Морфологія та структура прокаріотів, паразитичних одноклітинних еукаріотів та вірусів.

Читайте також